产品概述

本试剂盒基于SYBR Green染料法荧光定量RT-PCR技术,针对狂犬病病毒(Rabies Virus, RV)的保守基因区域设计特异性引物,可对样本中的病毒RNA进行高灵敏度、高特异性检测。适用于临床疑似感染样本、动物组织或疫苗质量监控的快速筛查。
产品名称 | 狂犬病病毒通用染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Rabies Virus Universal Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4432 |

试剂盒组分

RT-PCR反应液(含逆转录酶、Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等)
SYBR Green荧光染料
阳性对照(狂犬病病毒RNA片段,1×10^6 copies/μL)
阴性对照(无RNA酶水)
ROX参比染料(适配部分机型)
检测原理

RNA提取:需用户自备样本RNA(建议使用商品化RNA提取试剂盒)。
逆转录:试剂盒内含逆转录酶,可同步完成cDNA合成。
荧光定量PCR:SYBR Green染料与扩增产物双链DNA结合,通过实时荧光信号定量病毒RNA载量。
操作步骤

样本处理:
阳性对照需梯度稀释(建议10^2~10^7 copies/μL系列浓度)。
待测样本RNA需确保无降解(OD260/280比值1.8~2.0)。
反应体系配制(20μL/反应):
反应液15μL + 模板RNA 5μL。
PCR程序设置:
逆转录:50℃ 15分钟 → 预变性:95℃ 3分钟 → 扩增(40循环):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光)。
数据分析:
以阳性对照建立标准曲线,计算样本Ct值及病毒载量。
注意事项

特异性:引物经优化,不与常见犬科动物或其他狂犬病毒属交叉反应。
灵敏度:最低检测限为100 copies/μL。
应用限制:仅限科研使用,临床诊断需进一步验证。
生物安全:操作需在BSL-2实验室进行,废弃物料需高压灭菌处理。
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关键字: 狂犬病病毒通用;染料法荧光定量;RT-PCR试剂盒;