检验原理

本试剂盒基于SYBR Green I染料法实时荧光定量PCR技术,针对毛样枝孢霉基因保守区域设计特异性引物,通过荧光信号实时监测核酸扩增过程,实现定性及定量分析。
产品名称 | 毛样枝孢霉染料法荧光定量PCR试剂盒 | 英文名称 | Cladosporium trichoides Dye-based qPCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4452 |

产品特点

高特异性:引物针对毛样枝孢霉保守序列设计,与相近物种无交叉反应。
高灵敏度:检测限可达几百拷贝/反应(或0.1 pg RNA/DNA模板)。
便捷性:预混式试剂,即开即用,仅需提供待测核酸模板。
防污染设计:一管式闭管检测,避免气溶胶污染。
适用范围:适用于科研用途(不可用于临床诊断)。
试剂组成

| 组分名称 | 规格/包装 |
| 2×qPCR预混液(含SYBR Green) | 500 μL(棕色管) |
| 毛样枝孢霉特异性引物混合物 | 100 μL(白盖管) |
| 阳性对照(1×10^8拷贝/μL) | 50 μL(红盖管) |
| 荧光PCR专用模板稀释液 | 1 mL(黄盖管) |
| 使用说明书 | 1份 |
自备试剂
DNA/RNA模板
10×ROX校正染料(根据仪器型号选配)
运输与保存
低温运输(冰袋或干冰),-20℃避光保存,有效期12个月。
使用方法

1. 阳性对照稀释(以10^2–10^7拷贝/μL梯度为例)
标记6管稀释液,依次加入45 μL专用稀释液,梯度稀释阳性对照(每次换枪头)。
稀释后置于冰上备用,避免反复冻融。
2. 反应体系配制(20μL/反应)
| 组分 | 体积(μL) |
| 2×qPCR预混液 | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| 模板DNA/稀释阳性对照 | 2 |
| RNase-free水 | 补足至20 |
3. 扩增程序
预变性:95℃ 5分钟
循环阶段(40 cycles):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光)
熔解曲线分析:60–95℃(仪器默认设置)
注意事项

操作需在独立洁净区域进行,避免交叉污染。
阳性对照需与待测样本分区域操作。
熔解曲线需呈现单峰,否则可能存在非特异性扩增。
质量控制
阴性对照:无扩增曲线(Ct值≥40或无信号)。
阳性对照:Ct值≤35,且熔解峰单一。
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关键字: 毛样枝孢霉;染料法荧光定量;PCR试剂盒;