波氏杆菌（博代氏杆菌，博德特氏杆菌）通用染料法荧光定量PCR试剂盒

波氏杆菌（博代氏杆菌，博德特氏杆菌）通用染料法荧光定量PCR试剂盒

商品属性

产品概述

本试剂盒基于实时荧光定量PCR技术（qPCR），通过特异性荧光染料标记DNA产物，实现对波氏杆菌（包括博代氏杆菌、博德特氏杆菌）目的基因的定性与定量检测。适用于科研用途，具有高灵敏度、高特异性和宽线性范围等特点。

产品特点

即开即用：用户仅需提供待测DNA模板。

高灵敏度：优化引物设计，检测限低至10^2拷贝/μL。

特异性强：引物针对高度保守区域设计，避免交叉反应。

双重功能：支持定性与定量分析，定量线性范围达5个数量级（10^2–10^7拷贝/μL）。

内置对照：提供阳性对照（1×10^8拷贝/μL），便于排除假阴性。

包装规格

| 成分 | 规格 |

| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |

| 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |

| 引物混合液 | 100 μL（白盖） |

| 阳性对照（1×10^8拷贝/μL） | 50 μL（黄盖） |

| 使用说明书 | 1份 |

操作流程

标准曲线制备（样本制备区）

标记离心管：编号7至2，分别对应10^7–10^2拷贝/μL梯度。

稀释阳性对照：

7号管加入45 μL稀释液（如DEPC-H2O）及5 μL原液（1×10^8拷贝/μL），震荡混匀，得10^7拷贝/μL标准品。

依次梯度稀释至10^2拷贝/μL（6号至2号管）。

PCR反应体系（20 μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| PCR MagicMix 3.0 | 10 |

| 引物混合液 | 2 |

| 模板DNA | 2 |

| 超纯水 | 6 |

扩增程序

预变性：95℃ 5分钟；

循环阶段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；

溶解曲线分析（可选）。

注意事项

分区操作：标准品稀释需在独立区域完成，避免污染。

质量控制：每次实验需包含阴性对照（超纯水）与阳性对照。

存储条件：-20℃避光保存，有效期12个月；避免反复冻融。

结果判读

定性检测：Ct值≤35且扩增曲线呈S型判为阳性。

定量检测：通过标准曲线计算初始模板浓度。

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