预期用途

本试剂盒用于禽副粘病毒4型(APMV-4)RNA的体外定性检测,适用于动物组织、拭子样本等临床或科研样本的病原学诊断。其检测原理基于染料法荧光定量RT-PCR技术,通过特异性引物扩增病毒保守序列,结合荧光信号实时监测扩增过程,实现高灵敏度、高特异性的检测。
产品名称 | 禽副粘病毒4型染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 | 英文名称 | Avian Paramyxovirus 4 Dye-based qRT-PCR Kit |
产品规格 | 50T | 产品分类 | 荧光定量PCR |
检测类型 | PCR检测 | 产品货号 | PR4470 |

试剂盒组成

(50T/盒规格)
2×qPCR Master Mix:含DNA聚合酶、dNTPs及优化缓冲体系(500μL×1管,棕色管)。
荧光RT-PCR专用模板稀释液:用于样本RNA的稀释与保存(1mL×1管,黄盖)。
APMV-4特异性引物混合物:针对病毒保守区域设计(100μL×1管,白盖)。
APMV-4阳性对照(1×10^8拷贝/μL):用于质控反应体系(50μL×1管,红盖)。
阴性对照:无核酸酶水或PBS缓冲液(250μL×1管)。
使用手册:含操作流程、数据分析方法及注意事项。
储存条件与有效期
保存于-20℃±5℃,避光防冻融(反复冻融≤5次)。
有效期12个月。
适用仪器

兼容主流荧光定量PCR仪,包括但不限于:
ABI 7500
安捷伦 MX3000P/3005P
Bio-Rad CFX系列
Roche LightCycler
Eppendorf RealPlex
样本采集与处理
组织样本:取脑、肺、脾、肾等组织,匀浆后离心取上清。
拭子样本:采集口咽或泄殖腔拭子,置于含PBS(含抗生素)的保存液中。
RNA提取:建议使用柱式或磁珠法RNA提取试剂盒,避免降解。
检测流程

反应体系配制:按20μL/反应混合Master Mix、引物、模板RNA及对照品。
PCR程序设置:
逆转录:50℃ 15分钟
预变性:95℃ 3分钟
扩增循环(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号)
数据分析:以Ct值判定结果,阴性样本无扩增曲线,阳性对照Ct值≤35。
注意事项

本产品仅限科研使用,不可用于临床诊断。
操作需在无菌环境下进行,避免交叉污染。
不同批号组分不可混用。
性能参数

灵敏度:最低检测限为100拷贝/反应。
特异性:与禽副粘病毒其他亚型(如APMV-1、APMV-2)无交叉反应。
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关键字: 禽副粘病毒4型;染料法荧光定量;PCR试剂盒;