人踝或膝滑成纤维细胞 新品

人踝或膝滑成纤维细胞

细胞简介 ：

滑膜是关节囊的内层，淡红色，平滑闪光，薄而柔润，由疏松结缔组织组成。关节腔内的所有结构，除关节软骨、半月软骨板以外 ,即便是通过关节腔的肌腱、韧带等均全部为滑膜所包裹。滑膜分泌滑液，在关节活动中起重要作用。正常滑膜分为两层，即薄的细胞层(内腔层)和血管层(内膜下层)，是血管丰富的关节囊内膜，贴附于非关节面部分，覆盖于关节囊内的骨面上，不在软骨面上，此部分称为边缘区或裸区。

滑膜细胞有 A、B两型。巨噬细胞样A型细胞，表面有丝状伪足、浆膜内陷、囊泡、线粒体、溶酶体、胞浆纤维和高尔Chemicalbook基体，具有吞噬功能；B型成纤维样滑膜细胞(FLS)，有高浓度的内质网结构，是介导RA关节破坏的主要细胞。

 产品信息：

产品名称 人踝或膝滑成纤维细胞

英文名称 Primary human ankle or knee fibroblast cells

组织来源 关节滑膜组织

默认种属 人

产品规格 5×10^5Cells/T25

细胞特性：

1）手术取得人正常关节滑膜组织。

2)细胞鉴定： 纤维连接蛋白（ Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性 。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式：成纤维样细胞，贴壁培养。

我们推荐使用 Delf原代 成纤维 细胞培养体系 作为体外培养的培养基。

原代细胞培养操作

消化培养法

此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。

取材与剪切

同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。

将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm³），以便酶更好地发挥作用。

酶消化

将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。

在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。

终止与洗涤

加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。

将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。

接种与培养

用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10⁵ cells/mL）。

将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、11% CO₂ 培养箱中静置培养。

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注意事项：

使用细胞进行实验，请注意以下几点：

代数控制：尽量在低代数（如P3-P15）进行实验，以防止因传代过多导致的遗传漂移或功能衰退。

操作轻柔：原代细胞对环境变化敏感，解冻和传代时需格外小心，避免机械损伤。

营养需求：它们往往需要更复杂的营养成分（如特定的生长因子、血清），普通的培养基可能无法满足其生长需求。