运用双抗体夹心法。将抗大鼠AKT1抗体包被在酶标板上,样本和标准品中的AKT1与包被抗体结合,然后加入生物素化的抗大鼠AKT1抗体,形成免疫复合物,再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,与生物素结合,加入TMB底物显色,根据OD值与标准曲线,确定样本中AKT1的浓度。
产品名称
大鼠RACa丝氨酸;苏氨酸蛋白激酶(AKT1;PKBa)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/mL
英文名称
RatAKT1;PKBa elisa kit
货号
PR10629
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:大鼠
检测时间:1.5-2.5h
保存条件:2-8℃避光冷藏
特异性:精准识别大鼠 AKT1 蛋白
板内变异系数:<8%操作步骤:
从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液。静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
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上海博湖生物科技有限公司
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