运用双抗体夹心法。包被抗大鼠NFATC3抗体于酶标板,样本和标准品中的NFATC3与包被抗体结合,然后加入生物素化的抗大鼠NFATC3抗体,形成免疫复合物,再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,与生物素结合,加入TMB底物显色,颜色深浅与NFATC3含量成正比,通过酶标仪读数和标准曲线计算样本中NFATC3的浓度。
产品名称
大鼠T-细胞核因子3(NFATC3)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/mL
英文名称
RatNFATC3 elisa kit
货号
PR8541
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:大鼠
检测时间:1.5-2.5h
保存条件:2-8℃避光冷藏
特异性:无交叉免疫反应
板内变异系数:<8%操作步骤:
试剂准备:所有试剂恢复至室温(18–25℃),洗涤液如有结晶需加热溶解;
标准品配制:将冻干标准品用1mL标准品稀释液溶解,得2000 pg/mL原液,再倍比稀释成7个浓度梯度,另设空白孔(仅稀释液);
加样:每孔加入50μL样本或标准品,37℃孵育30–60分钟;
洗板:弃去孔内液体,用1×洗涤液洗板5次,拍干;
加酶标抗体:每孔加入100μL检测抗体-HRP,37℃孵育1小时;
洗板:同上;
显色:每孔加入50μL底物A + 50μL底物B,37℃避光孵育10–30分钟;
终止:每孔加入50μL终止液,颜色由蓝变黄;
读数:在450 nm波长下用酶标仪测定OD值,根据标准曲线计算样本浓度。
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上海博湖生物科技有限公司
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