运用双抗体夹心法。包被抗大鼠SEMA7A抗体于酶标板,样本和标准品中的SEMA7A与包被抗体结合,然后加入生物素化的抗大鼠SEMA7A抗体,形成免疫复合物,再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,与生物素结合,加入TMB底物显色,颜色深浅与SEMA7A含量成正比,通过酶标仪读数和标准曲线计算样本中SEMA7A的浓度。
产品名称
大鼠臂板蛋白7A(SEMA7A;CD108)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/mL
英文名称
RatSEMA7A;CD108 elisa kit
货号
PR7799
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
检测原理:双抗体夹心法 ELISA
种属反应性:大鼠
检测时间:1.5-2.5h
保存条件:2-8℃避光冷藏
特异性:无同类蛋白交叉反应
板内变异系数:<8%操作流程:
加样
设置标准品孔、样本孔和空白孔:标准品孔加入不同浓度的标准品50μL;样本孔先加样本稀释液40μL,再加待测样本10μL(样本最终稀释5倍,结果需乘以5);空白孔不加任何液体
温育
除空白孔外,每孔加入HRP标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃温育60分钟
洗板
弃去孔内液体,在吸水纸上拍干;每孔加满洗涤液,静置1分钟后弃去,重复洗板5次;最后一次洗板后需将孔内液体彻底拍干
显色
每孔加入底物液A、B各50μL,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟
终止反应
每孔加入终止液50μL,此时蓝色会立即转为黄色
读数
以空白孔调零,15分钟内用酶标仪测定450nm波长下各孔的吸光度(OD值)
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