采用双抗体夹心法。将抗大鼠ADAMTS5抗体包被在酶标板上,样本和标准品中的ADAMTS5与包被抗体结合,接着加入生物素化的抗大鼠ADAMTS5抗体,形成免疫复合物,再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素,与生物素结合,加入TMB底物显色,根据OD值与标准曲线,确定样本中ADAMTS5的浓度。
产品名称
大鼠解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)elisa试剂盒
灵敏度
0.078125ng/mL
英文名称
RatADAMTS5 elisa kit
货号
PR10682
检测范围
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夹心法数据:
以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
夹心法标曲:
核心参数:
原理:双抗体夹心法 ELISA
种属:大鼠特异性
样本:血清、血浆、细胞上清、组织匀浆
时长:3-4h
保存:2-8℃避光冷藏
特异性:特异性检测大鼠 ADAMTS5
板内 CV:<8%
板内 CV:<8%样本处理指南:
血清样本
全血标本室温放置2小时或4℃过夜
1000×g离心20分钟,取上清液检测
暂不检测的样本按单次用量分装,-20℃/-80℃冻存,避免反复冻融
血浆样本
采用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本
采集后30分钟内于2-8℃环境下1000×g离心15分钟
取上清液检测,避免使用溶血、高血脂样本
组织匀浆样本
预冷PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液
按1:9重量体积比加入PBS(1g组织对应9mL PBS),可添加蛋白酶抑制剂
冰上充分研磨或超声破碎,5000×g离心5-10分钟
取上清液检测
细胞培养上清样本
1000×g离心20分钟,去除细胞碎片
取上清液检测,避免使用含NaN3的样本(会抑制HRP酶活性)
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