采用双抗体夹心法。将抗大鼠p-GRK2抗体包被在酶标板上，样本和标准品中的p-GRK2与包被抗体结合，接着加入生物素化的抗大鼠p-GRK2抗体，形成免疫复合物，再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，与生物素结合，加入TMB底物显色，根据OD值与标准曲线，确定样本中p-GRK2的浓度。
产品名称 | 大鼠磷酸化G蛋白偶合受体激酶2(p-GRK2)elisa试剂盒 | 灵敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名称 | Ratp-GRK2 elisa kit | 货号 | PR8165 |
检测范围 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夹心法数据：
以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。
| 校准品浓度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夹心法标曲：
核心参数：
原理：磷酸化蛋白特异性双抗体夹心法 ELISA
种属：大鼠特异性
样本：血清、血浆、细胞上清、组织匀浆
时长：3-4h
保存：2-8℃避光冷藏
特异性：仅识别磷酸化型 GRK2，不结合总 GRK2
板内 CV：＜8%
试剂准备:
平衡：所有试剂回温至室温（20–25℃）。
洗涤液（1×）：30 mL 25× 浓缩洗液 + 720 mL 去离子水，混匀，2–8℃可存 1 个月。
标准品稀释：
每瓶标准品加1 mL稀释液，静置 15 min，轻柔混匀（避免气泡），得最高浓度 S7。
准备 7 个 EP 管，各加250 μL稀释液，倍比稀释：
S7：原液（如 160 μg/L）
S6：250 μL S7 + 250 μL 稀释液
S5 至 S1 依次稀释
S0：稀释液（空白对照）
生物素化抗体（1×）：按 1:100 稀释（如 12 μL 100× 浓缩 + 1.2 mL 稀释液），现配现用。
SAV‑HRP（1×）：按 1:100 稀释，现配现用，避光。
常见问题
高背景：洗板不足、SAV‑HRP 浓度过高、孵育温度过高 / 时间过长、污染。
标准曲线线性差：标准品稀释错误、孵育时间不准、读数超时。
样品值偏低：样品降解、稀释倍数过高、加样误差。
公司正在出售的产品：
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关键字： 大鼠磷酸化G蛋白偶合受体激酶2;p-GRK2;elisa试剂盒;
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