大鼠去甲基化酶(demethylase)elisa试剂盒 新品

采用双抗体夹心法。将抗大鼠demethylase抗体包被在酶标板上，样本和标准品中的demethylase与包被抗体结合，接着加入生物素化的抗大鼠demethylase抗体，形成免疫复合物，再加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素，与生物素结合，加入TMB底物显色，根据OD值与标准曲线，确定样本中demethylase的浓度。

夹心法数据：

以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验数据建立标准曲线。

夹心法标曲：

核心参数：

原理：双抗体夹心法 ELISA

种属：大鼠特异性

样本：血清、血浆、细胞上清、核蛋白样本

时长：3-4h

保存：2-8℃避光冷藏

特异性：识别大鼠去甲基化酶家族蛋白

板内 CV：＜8%

试剂准备:

平衡：所有试剂回温至室温（20–25℃）。

洗涤液（1×）：30 mL 25× 浓缩洗液 + 720 mL 去离子水，混匀，2–8℃可存 1 个月。

标准品稀释：

每瓶标准品加1 mL稀释液，静置 15 min，轻柔混匀（避免气泡），得最高浓度 S7。

准备 7 个 EP 管，各加250 μL稀释液，倍比稀释：

S7：原液（如 160 μg/L）

S6：250 μL S7 + 250 μL 稀释液

S5 至 S1 依次稀释

S0：稀释液（空白对照）

生物素化抗体（1×）：按 1:100 稀释（如 12 μL 100× 浓缩 + 1.2 mL 稀释液），现配现用。

SAV‑HRP（1×）：按 1:100 稀释，现配现用，避光。

常见问题

高背景：洗板不足、SAV‑HRP 浓度过高、孵育温度过高 / 时间过长、污染。

标准曲线线性差：标准品稀释错误、孵育时间不准、读数超时。

样品值偏低：样品降解、稀释倍数过高、加样误差。

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