1.产品名称:人支气管成纤维细胞
2.组织来源:支气管组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
人支气管成纤维细胞分离自支气管组织;支气管(Bronchi),是指由气管分出的各级分枝,由气管分出的一级支气管,即左、右主支气管。左主支气管与右主支气管相比较,前者较细长,走向倾斜;后者较粗短,走向较前者略直,所以经气管堕入的异物多进入右主支气管。支气管和气管还有以区别就是,气管是以“C”型的气管软骨为支架,而支气管不是。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的支气管成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。支气管成纤维细胞在生理条件下的主要功能包括:构造和维持组织的正常形态,合成和释放细胞外基质以及组织损伤后及时大量聚集修复损伤组织。
本公司生产的支气管成纤维细胞采用胶原酶-胰酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
DMEM[H]、FBS、成纤维细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

细胞收到后处理:
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松)
细胞培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
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上海雅吉生物科技的核心业务主要围绕生命科学研究所需的各类试剂、细胞、抗体及技术服务展开,具体可归纳为以下几个方面:
细胞产品与技术平台:
细胞产品:提供包括正常细胞、肿瘤细胞、肿瘤耐药细胞在内的多种细胞系。同时,公司也是美国ScienCell等品牌的原代细胞产品的代理商。
稳转细胞株构建服务:公司具备丰富的蛋白表达研究经验,能够为客户提供从基因序列到稳定细胞株交付的一站式定制服务,应用于基因功能研究、药物筛选和重组蛋白生产等领域。
科研试剂:这是公司的基础和优势业务。产品线全面覆盖了分子生物学、免疫学、细胞生物学和微生物学等多个学科。
ELISA试剂盒:提供人、大鼠、小鼠、犬、鱼、鸡、牛等多种物种以及植物的ELISA检测试剂盒,在国内众多重点实验室中广泛使用并被科研文献引用。生化试剂、抗体与血清:提供包括一抗、二抗、单克隆/多克隆抗体在内的多种抗体产品,以及胎牛血清等细胞培养用血清。
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