基质金属蛋白酶9抗体
原理特点
该抗体靶向MMP9明胶酶,原理是特异性结合MMP9抗原位点,降解基底膜胶原,主导肿瘤浸润、炎症细胞浸润、血管新生。产品特点为特异性区分MMP9与MMP2,背景噪音低,重复性好,是肿瘤转移、炎症损伤、血管病变研究的常用抗体。
英文名称:MMP9 Rabbit pAb
中文名称:基质金属蛋白酶9抗体

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:Matrix metalloproteinase-9 precursor; MMP-9; MMP9; MMP 9; 92 kDa type IV; Collagenase; 92 kDa gelatinase; Gelatinase B; GELB; MMP9_HUMAN; 82 kDa matrix metalloproteinase-9; 92 kDa type IV collagenase; CLG 4B; CLG-4B; CLG4B; Collagenase Type 4 beta; Collagenase Type-4 beta; Collagenase type IV 92 KD; Collagenase type IV 92 KD; EC 3.4.24.35; Gelatinase 92 KD; Gelatinase 92 KD; Gelatinase beta; Gelatinase-beta; GelatinaseB; GELB; Macrophage gelatinase; MANDP2; Matrix metallopeptidase 9(gelatinase B, 92kDa gelatinase, 92kDa type IV collagenase); Matrix Metalloproteinase 9; Type V collagenase.
交叉反应:Human
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human MMP9
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:78 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
明胶酶B特性:基质金属蛋白酶9(MMP9),又称明胶酶B,是MMP家族中可降解Ⅳ型胶原和明胶的关键酶,参与ECM重塑、血管生成、炎症反应、肿瘤侵袭等过程,是组织修复和病理进展的重要调控因子。
疾病关联:MMP9在多种炎症性疾病(如肺炎、类风湿关节炎)、肿瘤、心血管疾病中高表达,促进组织损伤、肿瘤转移和血管生成,其表达水平与疾病严重程度和不良预后密切相关。
临床应用:MMP9抗体可用于检测体液或组织中MMP9表达水平,评估疾病活动度和预后;开发靶向MMP9的治疗药物,如MMP9抑制剂可抑制炎症反应、肿瘤转移⤠Ꙝ⤠
核心实验操作方法
1. Western Blot(WB)
抗体孵育
一抗孵育:用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度(如1:1000),4℃摇床缓慢孵育过夜;或室温孵育1-2小时,孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤:用TBST缓冲液洗涤3次,每次5分钟,洗去未结合的一抗;加入HRP标记二抗(1:5000-1:10000稀释),室温孵育1小时。
显影:再次洗涤后,加入ECL发光液孵育1-2分钟,用化学发光成像仪采集图像,根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化(IHC)
抗体孵育
一抗孵育:滴加稀释后的一抗(如1:200)于组织切片上,置于湿盒中4℃孵育过夜;次日室温复温30分钟,PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入生物素标记二抗(1:200)室温孵育30分钟,PBS冲洗后加入ABC复合物(1:100)室温孵育30分钟。
显色封片:DAB显色剂显色3-10分钟(显微镜下观察控制时间),苏木素复染1分钟,梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光(IF)
抗体孵育
一抗孵育:用5% BSA稀释抗体至工作浓度(如1:100),滴加在细胞爬片上,4℃避光孵育过夜;室温复温后PBS冲洗3次,每次5分钟。
二抗结合:加入荧光标记二抗(如FITC标记抗兔IgG,1:200),室温避光孵育30-60分钟;PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察:荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察,激发波长根据二抗标记物选择(如FITC为488nm)。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被:用包被缓冲液(pH9.6碳酸盐缓冲液)稀释抗原至1-10μg/ml,每孔加入100μl,4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育:弃去包被液,PBST洗涤3次,加入5% BSA封闭液200μl/孔,37℃孵育1小时;加入稀释后的一抗100μl/孔,37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测:洗涤后加入酶标二抗(1:5000),37℃孵育1小时;TMB底物溶液显色10-30分钟,2M硫酸终止反应后,酶标仪450nm波长读取OD值。
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