碱性磷酸酶(组织非特异性)抗体
原理特点
该抗体靶向组织非特异性碱性磷酸酶，原理是特异性识别广谱表达的ALP抗原位点，参与组织代谢、骨重塑、细胞分化。产品特点为广谱特异性高，不与组织特异性ALP交叉反应，稳定性好，适配细胞分化、骨代谢、组织损伤检测研究。
英文名称:Alkaline Phosphatase, Tissue Non-Specific isozyme Rabbit pAb
中文名称:碱性磷酸酶(组织非特异性)抗体
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:AKP2; Alkaline phosphatase liver/bone/kidney; Alkaline phosphatase liver/bone/kidney isozyme; Alkaline phosphatase tissue nonspecific isozyme; Alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme; ALPL; AP TNAP; AP-TNAP; APTNAP; BALP; BAP; FLJ40094; FLJ93059; Glycerophosphatase; HOPS; Liver/bone/kidney isozyme; Liver/bone/kidney type alkaline phosphatase; MGC161443; MGC167935; PHOA; PPBT_HUMAN; Tissue non specific alkaline phosphatase; Tissue nonspecific ALP; TNAP; TNSALP.
交叉反应:Human,Mouse,Rat
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Alkaline Phosphatase, Tissue Non-Specific isozyme
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
克隆号：None
理论分子量：56 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
酶学功能与组织表达：组织非特异性碱性磷酸酶（TNAP）是依赖Zn²⁺的磷酸酯酶，主要表达于骨骼、肝脏、肾脏等组织，参与骨矿化、磷代谢、解毒等生理过程，维持组织稳态和代谢平衡。
疾病诊断与关联：TNAP水平异常与骨代谢疾病（如佝偻病、骨质疏松症）、肝胆疾病（如肝炎、肝硬化）、肾功能异常等相关，其血清水平可辅助疾病诊断、病情监测和预后评估。
研究应用：TNAP抗体可用于检测TNAP表达水平和活性，研究骨矿化机制、疾病发病机制，开发治疗骨代谢疾病和肝胆疾病的药物；评估TNAP水平与疾病状态和治疗效果的关联，指导⤠Ꙝ⤠
核心实验操作方法
1. Western Blot（WB）
抗体孵育
一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。
显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化（IHC）
抗体孵育
一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。
二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。
显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光（IF）
抗体孵育
一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。
二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。
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