磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗体
原理特点
磷酸化GCN2是氨基酸饥饿、应激应答的核心活化激酶，调控细胞蛋白质合成、应激适应。该抗体特异性识别GCN2磷酸化位点，检测细胞营养应激活化状态；同时可阻断激酶活性，解除应激介导的蛋白合成抑制。
英文名称:phospho-GCN2 (Thr899) Rabbit pAb
中文名称:磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗体
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:GCN2(phospho T899); p-GCN2(phospho T899); EIF2AK4; Eukaryotic Translation Initiation Factor 2-alpha kinase 4; GCN2-like protein; KIAA1338; E2AK4_HUMAN; Eif2ak4; Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 alpha kinase 4; GCN2; GCN2 eIF2alpha kinase; GCN2-like protein; MGCN2.
交叉反应:Human,Mouse
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human GCN2 around the phosphorylation site of Thr899
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量：189 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景：GCN2 是氨基酸匮乏应激感知激酶，氨基酸不足时自身苏氨酸位点磷酸化激活，磷酸化 eIF2α 抑制全局蛋白翻译，启动应激保护。
抗体原理：GCN2 活化环磷酸多肽免疫，特异性标记磷酸活化态 GCN2，不识别静息酶蛋白。
产品特点：用于营养应激、肿瘤氨基酸代谢、病毒感染翻译抑制机制研究，WB 可量化激酶活化程度。
实验操作关键
样本前处理
细胞样本：用PBS缓冲液轻洗2-3次去除培养基残留，固定（如4%多聚甲醛）后按需进行通透处理（0.3% Triton X-100），封闭液（5% BSA或血清）孵育30-60分钟以降低非特异性结合。
组织样本：石蜡切片需先脱蜡水化，根据抗体类型选择合适的抗原修复方法（如柠檬酸盐缓冲液热修复）；新鲜组织需尽快固定或冷冻保存。
抗体孵育
一抗孵育：通常4℃过夜孵育（12-16小时），或室温孵育1-2小时；孵育时需保证样本完全被抗体覆盖，可放置于湿盒中防止液体挥发。
二抗结合：选择与一抗种属匹配的二抗，室温避光孵育30-60分钟；洗板/洗片需充分，通常用PBS或TBST清洗3-5次，每次5分钟，去除未结合的二抗。
结果检测
荧光检测：荧光标记抗体需避光操作，封片时使用抗淬灭剂，染色后1小时内完成观察，或4℃避光保存不超过4小时。
显色反应：酶标抗体需严格控制底物孵育时间，避免显色过度或不足；终止反应后及时读取数据，部分显色产物易褪色需尽快分析。
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