磷酸化三羟基三甲基辅酶A还原酶抗体
原理特点
该酶磷酸化修饰调控胆固醇合成限速步骤，主导机体脂质合成代谢。该抗体特异性识别其磷酸化活化形式，检测胆固醇合成通路活性；阻断酶功能可抑制脂质合成，调控血脂代谢稳态。
英文名称:phospho-HMGCR (Ser872) Rabbit pAb
中文名称:磷酸化三羟基三甲基辅酶A还原酶抗体
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:phospho-HMGCR(S872); HMGCR(phospho-Ser872); HMGCR(phospho S872); 3 hydroxy 3 methylglutaryl CoA reductase; 3 hydroxy 3 methylglutaryl Coenzyme A reductase; 3 hydroxymethylglutaryl CoA reductase; 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA reductase(NADPH); 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase; 3H3M; HMDH_HUMAN; HMG CoA reductase; HMG CoAR; HMG-CoA reductase; Hydroxymethylglutaryl CoA reductase; LDLCQ3; MGC103269; Red.
交叉反应:Human,Mouse,Rat,Rabbit
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human HMGCR around the phosphorylation site of Ser872
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量：97 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景：HMGCR 是胆固醇合成限速酶，AMPK 介导其丝氨酸位点磷酸化后酶活性被抑制，他汀类药物也靶向调控该蛋白活性。
抗体原理：靶向 HMGCR 抑制型磷酸化位点多肽，特异性检测失活磷酸化 HMGCR，区分总蛋白含量与活性状态。
产品特点：肝细胞、脂肪组织样本适配，用于脂代谢紊乱、高血脂、动脉粥样硬化及降脂药物体外药效筛选。
核心实验操作方法
1. Western Blot（WB）
抗体孵育
一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。
显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化（IHC）
抗体孵育
一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。
二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。
显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光（IF）
抗体孵育
一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。
二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。
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