磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
原理特点
该抗体特异性识别ERK5蛋白特异性磷酸化修饰位点，仅结合活化状态的ERK5激酶。细胞外信号调节激酶5是MAPK信号通路重要亚型，其磷酸化活化可介导细胞增殖、分化、应激应答与血管生成，该抗体可精准检测ERK5的磷酸化活化水平，反映MAPK-ERK5通路激活状态；同时可封闭磷酸化活性位点，阻断激酶下游信号传导，抑制细胞应激活化与异常增殖，助力研究细胞应激损伤、肿瘤增殖、血管重塑机制。
英文名称:phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220) Rabbit pAb
中文名称:磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体
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Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:ERK5(phospho T218+Y220); ERK5(phospho Thr218+Tyr220); Big MAP kinase 1; BMK 1; BMK 1 kinase; BMK-1; BMK1; BMK1 Kinase; EC 2.7.11.24; ERK 4; ERK 5; ERK4; Extracellular Signal Regulated Kinase 5; Extracellular signal-regulated kinase 5; MAP kinase 7; MAPK 7; MAPK7; Mitogen Activated Protein Kinase 7; Mitogen-activated protein kinase 7; MK07_HUMAN; OTTHUMP00000065906; OTTHUMP00000065907; PRKM 7; PRKM7; PROTEIN KINASE, MITOGEN-ACTIVATED, 7.
交叉反应:Human,Rat
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human ERK5 around the phosphorylation site of Thr218 + Tyr220
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量：90 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景：ERK5 为独立 MAPK 亚型，调控内皮保护、心肌肥大、细胞生存，应激与生长因子刺激下特异性磷酸化激活。
抗体原理：ERK5 专属磷酸化基序肽免疫，与 ERK1/2 无交叉识别。
产品特点：心血管内皮、心肌细胞模型专属，研究血管保护、高血压心肌肥厚通路机制。
样本处理标准流程
1. 细胞样本制备
洗涤：用预冷PBS轻贴细胞表面洗涤2-3次，避免用力冲洗导致细胞脱落。
固定与通透：4℃预冷的4%多聚甲醛固定15-20分钟；如需检测胞内蛋白，用0.1-0.3% Triton X-100室温通透10-15分钟。
封闭：用5% BSA或10%胎牛血清室温封闭30-60分钟，减少非特异性结合。
2. 组织样本制备
石蜡切片：依次放入二甲苯（2次，每次10分钟）、梯度乙醇（100%→95%→80%→70%，各5分钟）脱蜡水化；柠檬酸缓冲液（pH6.0）热修复10-15分钟，自然冷却至室温。
新鲜组织：取材后立即用4%多聚甲醛固定24-48小时，或-80℃冷冻保存；冷冻切片厚度控制在5-10μm，贴片后自然干燥30分钟。
3. WB蛋白样本制备
用RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制剂）冰上裂解细胞30分钟，12000rpm离心15分钟取上清。
BCA法或Bradford法定量蛋白浓度，调整至上样量一致；加入5×SDS上样缓冲液，95℃加热5-10分钟变性，-20℃保存备用。
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