磷酸化细胞信号转导分子SMAD2/SMAD3抗体
原理特点
该抗体广谱识别SMAD2与SMAD3蛋白的磷酸化活化位点，特异性结合TGF-β通路活化态核心分子。SMAD2/3磷酸化是TGF-β信号激活的标志性步骤，可介导细胞增殖、纤维化、肿瘤侵袭与免疫调控，该抗体可整体检测SMAD2/3磷酸化水平，宏观评估TGF-β通路活化强度；同时可封闭磷酸化位点，阻断其核转位与靶基因转录，抑制纤维化进程与肿瘤细胞侵袭转移，广泛用于纤维化疾病、肿瘤进展机制研究。
英文名称:phospho-Smad2/Smad3 (Thr8) Rabbit pAb
中文名称:磷酸化细胞信号转导分子SMAD2/SMAD3抗体
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:Smad2+Smad3(phospho T8); p-Smad2+Smad3(phospho T8); P-Smad2/3(phospho T8); hMAD 2; hMAD 3; hSMAD2; hSMAD3; Mad related protein 2; MADH2; MADH3; MADR2; Mothers against DPP homolog 2; Mothers against DPP homolog 3; Sma and Mad related protein 2; SMA and MAD related protein 3; SMAD 2; SMAD 3; SMAD family member 2; SMAD family member 3.
交叉反应:Human,Mouse
抗体来源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human Smad2/Smad3 around the phosphorylation site of Thr8
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量：52 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景：Smad2/3 为 TGF-β 通路核心 R-Smad，配体刺激磷酸化后与 Smad4 聚合入核，介导纤维化、肿瘤转移、免疫抑制。
抗体原理：Smad2/3 保守 C 端磷酸化肽免疫，同时捕获两种活化亚型。
产品特点：肝、肾、肺纤维化模型通用，一步检测 TGF-β 通路整体激活水平。
实验优化与注意事项
抗体浓度优化
方阵滴定法：设置一抗浓度梯度（如1:200, 1:500, 1:1000）和二抗浓度梯度，选择信噪比最高的组合
预实验：首次使用建议进行浓度梯度预实验，确定最佳工作浓度
样本处理要点
细胞样本：贴壁细胞用细胞刮收集，悬浮细胞离心收集，尽量吸尽上清避免残留培养基
组织样本：新鲜组织建议液氮速冻后-80℃保存，避免反复冻融
磷酸化蛋白：全程冰上操作，加入磷酸酶抑制剂防止蛋白去磷酸化
结果判断与分析
WB：观察是否出现特异性条带，阴性对照应无条带或明显弱于阳性对照
IHC：阳性信号应定位于目标蛋白的正常亚细胞结构（如细胞核、细胞膜）
IF：观察荧光信号是否与目标蛋白亚细胞定位一致，DAPI染色定位细胞核
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