磷酸化原癌基因Yes相关蛋白1重组兔单抗
原理特点
该重组兔单抗高特异性靶向磷酸化YAP1蛋白，亲和力高、检测背景低，可精准识别低丰度磷酸化修饰的YAP1。其可高精度定量检测YAP1磷酸化水平，精准反映Hippo通路活性与细胞增殖稳态；同时可强效封闭磷酸化修饰位点，精准调控YAP1核质穿梭与转录活性，适配高精度肿瘤通路机制研究与靶向干预实验。
英文名称:phospho-YAP1 (Ser127) Recombinant Rabbit mAb
中文名称:磷酸化原癌基因Yes相关蛋白1重组兔单抗
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文别名:phospho-YAP1(S127); YAP1(S127); YAP1(phospho Ser127); YAP1(phospho S127); 65 kDa Yes associated protein; YAp 1; YAP 65; YAP; YAP2; YAP65; Yes associated protein 1 65kDa; Yes associated protein 1; Yes associated protein 2; YKI; Transcriptional coactivator YAP1; Yes-associated protein 1; Protein yorkie homolog; Yes-associated protein YAP65 homolog; YAP1_HUMAN.
交叉反应:Human,Mouse,Rat
抗体来源:Rabbit
免疫原:A synthesized peptide derived from human YAP1 around the phosphorylation site of S127
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Recombinant
克隆号：1H12
理论分子量：55 kDa
浓度：1mg/ml
储存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶点背景
靶点背景：YAP1 Ser127 磷酸化负调控转录活性，是 Hippo 通路激活直接标志物。
抗体原理：重组兔单克隆体外表达，精准锁定 Ser127 磷酸表位，批次无差异。
产品特点：共聚焦多色荧光、临床肿瘤病理大样本定量，数据重复性极高。
核心实验操作方法
1. Western Blot（WB）
抗体孵育
一抗孵育：用5%脱脂牛奶或BSA稀释抗体至推荐浓度（如1:1000），4℃摇床缓慢孵育过夜；或室温孵育1-2小时，孵育时保证膜完全浸没在抗体溶液中。
洗涤：用TBST缓冲液洗涤3次，每次5分钟，洗去未结合的一抗；加入HRP标记二抗（1:5000-1:10000稀释），室温孵育1小时。
显影：再次洗涤后，加入ECL发光液孵育1-2分钟，用化学发光成像仪采集图像，根据信号强度调整曝光时间。
2. 免疫组化（IHC）
抗体孵育
一抗孵育：滴加稀释后的一抗（如1:200）于组织切片上，置于湿盒中4℃孵育过夜；次日室温复温30分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。
二抗结合：加入生物素标记二抗（1:200）室温孵育30分钟，PBS冲洗后加入ABC复合物（1:100）室温孵育30分钟。
显色封片：DAB显色剂显色3-10分钟（显微镜下观察控制时间），苏木素复染1分钟，梯度乙醇脱水后中性树胶封片。
3. 免疫荧光（IF）
抗体孵育
一抗孵育：用5% BSA稀释抗体至工作浓度（如1:100），滴加在细胞爬片上，4℃避光孵育过夜；室温复温后PBS冲洗3次，每次5分钟。
二抗结合：加入荧光标记二抗（如FITC标记抗兔IgG，1:200），室温避光孵育30-60分钟；PBS冲洗后用抗淬灭封片液封片。
观察：荧光显微镜或共聚焦显微镜下观察，激发波长根据二抗标记物选择（如FITC为488nm）。
4. ELISA实验
包被与孵育
包被：用包被缓冲液（pH9.6碳酸盐缓冲液）稀释抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃过夜孵育。
封闭与一抗孵育：弃去包被液，PBST洗涤3次，加入5% BSA封闭液200μl/孔，37℃孵育1小时；加入稀释后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
检测：洗涤后加入酶标二抗（1:5000），37℃孵育1小时；TMB底物溶液显色10-30分钟，2M硫酸终止反应后，酶标仪450nm波长读取OD值。
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