CENTA

一、基础标识（主流 CAS：80072-86-2，部分旧标 9073-60-3 为同一物质）

1. 全称：CENTA β-Lactamase Substrate

2. 系统化学名

   (6R,7R)-3-[(3 - 羧基 - 4 - 硝基苯基) 硫甲基]-8 - 氧代 - 7-(2 - 噻吩乙酰氨基)-5 - 硫杂 - 1 - 氮杂双环 [4.2.0] 辛 - 2 - 烯 - 2 - 羧酸

3. 分子式：\(\mathbf{C_{21}H_{17}N_3O_8S_3}\)

4. 分子量：535.57

5. 纯度：商用标准 ≥98%（HPLC）

6. PubChem CID：133358

二、显色原理（头孢类生色底物）

• 未水解：浅淡黄色，最大吸收 λₘₐₓ = 340 nm

• 酶切水解后：亮铬黄色，最大吸收 λₘₐₓ = 405 nm

• 405 nm 吸光度变化直接定量酶活，兼容酶标仪分光检测

对比同类底物

• Nitrocefin：红 / 黄变色，易受血清、巯基干扰

• PADAC：紫色底物，稳定性差

• CENTA 优势：耐受培养基、血清、巯基乙醇、半胱氨酸，背景低，稳定性更强

三、溶解与储存

1. 溶解性

• 有机相：甲醇、DMSO 可配高浓度母液

• 水相：PBS 缓冲液最高溶解至 25 mM，工作液常用 1–5 mM

2. 储存条件

• 固体粉末：-20℃干燥避光密封，保质期 12–36 个月

• DMSO/PBS 母液：分装 - 80℃避光，避免反复冻融

3. 形态：淡黄色固体粉末

四、核心用途（微生物 / 酶学实验）

1. 临床菌株产 β- 内酰胺酶快速筛查（革兰阴 / 阳性菌通用）

2. 定量检测 TEM、SHV、CTX-M、AmpC 等各类 β- 内酰胺酶活性

3. 抑制剂筛选：测定克拉维酸、阿维巴坦等 β- 内酰胺酶抑制剂 IC₅₀

4. 药敏配套实验、耐药菌高通量酶活筛选

五、关键实验参数

• 检测波长：405 nm

• 缓冲体系：pH 7.0–7.5 PBS / 磷酸缓冲液

• 工作终浓度推荐：100–500 μM

• 无荧光，仅比色法检测，不属于荧光探针

六、溶剂残留参考（合成 / 质控常用）

• 二氯甲烷 ≤600 ppm

• 乙酸乙酯 ≤5000 ppm

  羧基在 CD₃OD 中会 H/D 交换，¹H NMR 羧基峰消失；¹³C 羰基碳 δ 170–178 ppm。