异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷,通常简称为IPTG(CAS号 367-93-1),是分子生物学实验中极其重要的一种试剂。它的核心用途是作为乳糖操纵子的诱导剂,用于诱导外源蛋白在大肠杆菌中表达。
核心用途
IPTG之所以被广泛应用,源于其独特的作用机制:它是一种不被细菌代谢的乳糖类似物,能持续与lac阻遏蛋白结
合,解除其对目的基因转录的抑制,从而稳定地诱导蛋白表达。具体应用包括:
诱导蛋白表达:这是其最重要的用途。在带有Lac、Tac、T7、Trc等启动子的表达系统中,IPTG被用来高效诱导
目的重组蛋白的表达。
蓝白斑筛选:在克隆实验中,与显色底物X-Gal联合使用,用于区分含有重组质粒的菌落(白色)和空载体菌落
(蓝色),是基因克隆中一种经典的筛选方法。
在实验操作中,通常将IPTG配制成无菌水溶液(如1M或0.8M储液),过滤除菌后于-20°C保存,使用时按需稀
释。
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