大鼠基质金属蛋白酶23A(MMP23A)重组蛋白可探究膜型金属蛋白酶功能、细胞凋亡调控、生殖相关生理过程及蛋白酶底物鉴定实验。
型号:YS-DB2069
产品名称:大鼠基质金属蛋白酶23A(MMP23A)重组蛋白
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名称:Recombinant Matrix Metalloproteinase 23A (MMP23A)
CA-MMP; MMP23-A; MIFR; MIFR-1; MMP-21; Pseudogene; Femalysin; Matrix metalloproteinase-23, soluble form
酶与激酶
心脑血管
生殖科学
物种:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
来源:原核表达
宿主E.coli
内毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法测定)
亚细胞定位::内质网腔, 外泌体
预测分子量:39.9kDa
实际分子量:40kDa(差异分析请参阅说明书)
片段与标签:Ser71~Tyr383 with N-terminal His Tag
缓冲液成份:20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性状:冻干粉
纯度:> 90%
等电点:9.6
应用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
规格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理:

SDS-PAGE 纯度分析:变性电泳分离蛋白组分,染色分析主条带纯度、降解片段含量。
BCA 蛋白定量:蛋白还原铜离子显色反应,吸光度对标标准曲线测算蛋白浓度。
WB 特异性鉴定:MMP23A 特异性抗体抗原特异性结合,特异性条带验证重组蛋白构建正确。
荧光多肽底物酶活检测:MMP23A 切割特异性荧光淬灭多肽底物,释放荧光基团,荧光强度变化定量蛋白酶水解活性。
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常见实验场景操作指南:

细胞培养实验
浓度优化:先设置预实验梯度(如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL),检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况,确定最优工作浓度。
添加时机:细胞接种后24-48小时,待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。
更换培养基:若蛋白半衰期较短,需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。
免疫检测实验
阳性对照设置:在ELISA或WB实验中,用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线,确保定量准确性。
封闭处理:若蛋白用于包被ELISA板,包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭,降低非特异性结合。
抗体配对:选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体,避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。
蛋白相互作用实验
标签选择:若使用Pull-down实验,优先选择GST或His标签的重组蛋白,便于亲和层析分离。
反应条件:在生理缓冲液(如PBS)中进行,温度控制在4℃,避免蛋白变性。
阴性对照:设置不含目标蛋白的对照组,排除标签非特异性结合的干扰。
关键字: 大鼠基质金属蛋白酶23A;MMP23A;重组蛋白;
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