大鼠甲基丙二酰辅酶A异构酶(MCEE)重组蛋白

大鼠甲基丙二酰辅酶A异构酶(MCEE)重组蛋白可开展支链氨基酸代谢通路分析、有机酸代谢缺陷疾病、酶活性定量及突变体功能验证实验。

型号：YS-DB2535

产品名称：大鼠甲基丙二酰辅酶A异构酶(MCEE)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Methylmalonyl Coenzyme A Epimerase (MCEE)

GLOD2; Glyoxalase Domain Containing 2; DL-methylmalonyl-CoA racemase

酶与激酶

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：线粒体

预测分子量：18.7kDa

实际分子量：18kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Gln39~Ala178 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 97%

等电点：6.7

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

SDS-PAGE 纯度分析：变性电泳分离蛋白，染色分析主条带纯度、降解片段含量。

BCA 蛋白定量：蛋白介导铜离子还原显色，吸光度换算重组蛋白浓度。

WB 特异性鉴定：MCEE 特异性抗体抗原特异性结合，验证重组蛋白表达正确。

辅酶 A 底物异构酶活检测：催化甲基丙二酰辅酶 A 构型异构转化，检测底物转化率表征异构酶活性。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。