大鼠脑膜瘤表达抗原5(MGEA5)重组蛋白

大鼠脑膜瘤表达抗原5(MGEA5)重组蛋白用于 O-GlcNAc 水解酶活性检测、蛋白糖基化修饰、细胞代谢与肿瘤发生机制研究实验。

型号：YS-DB47

产品名称：大鼠脑膜瘤表达抗原5(MGEA5)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Meningioma Expressed Antigen 5 (MGEA5)

NAGase; MEA5; NCOAT; Hexosaminidase C; N-Acetylhexosaminidase; Hyaluronidase; Meningioma-Expressed Antigen 5; Nuclear Cytoplasmic O-GlcNAcase And Acetyltransferase

酶与激酶

肾标志物

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：Nucleus. Cytoplasm

预测分子量：25.2kDa

实际分子量：26kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Ala19~Thr222 with

缓冲液成份：磷酸盐缓冲液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：5.3

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

抗原位点专一结合：抗 MGEA5 抗体特异性识别重组蛋白特有抗原序列，无同源蛋白交叉反应。

夹心免疫酶促信号放大：免疫复合物携带活性标记酶，底物显色实现蛋白定量信号输出。

梯度标准品定量校正：MGEA5 标准品构建标准曲线，检测待测重组蛋白含量。

封闭抑制非特异性吸附：封闭载体空余结合位点，降低杂蛋白吸附带来检测误差。
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常见实验场景操作指南：

细胞培养实验

浓度优化：先设置预实验梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），检测细胞增殖、分化或信号通路激活情况，确定最优工作浓度。

添加时机：细胞接种后24-48小时，待细胞贴壁且状态稳定时添加重组蛋白。

更换培养基：若蛋白半衰期较短，需每隔24-48小时更换含新鲜蛋白的培养基。

免疫检测实验

阳性对照设置：在ELISA或WB实验中，用已知浓度的重组蛋白制备标准曲线，确保定量准确性。

封闭处理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脱脂牛奶或BSA封闭，降低非特异性结合。

抗体配对：选择针对不同表位的捕获抗体和检测抗体，避免与重组蛋白的标签产生交叉反应。

蛋白相互作用实验

标签选择：若使用Pull-down实验，优先选择GST或His标签的重组蛋白，便于亲和层析分离。

反应条件：在生理缓冲液（如PBS）中进行，温度控制在4℃，避免蛋白变性。

阴性对照：设置不含目标蛋白的对照组，排除标签非特异性结合的干扰。