大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Ha1)重组蛋白 新品

大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Ha1)重组蛋白适配胶原蛋白羟化修饰、纤维化进程、细胞外基质重塑及组织纤维化机制研究实验。

型号：YS-DB770

产品名称：大鼠脯氨酸-4-羟化酶α多肽Ⅰ(P4Ha1)重组蛋白

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名称：Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I (P4Ha1)

Procollagen-Proline,2-Oxoglutarate 4-Dioxygenase(Proline 4-Hydroxylase),Alpha Polypeptide I

酶与激酶

物种：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

来源：原核表达

宿主E.coli

内毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法测定)

亚细胞定位：：分泌

预测分子量：41.3kDa

实际分子量：44kDa(差异分析请参阅说明书)

片段与标签：Val205~Glu534 with N-terminal His Tag

缓冲液成份：20mM Tris, 150mM NaCl缓冲液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性状：冻干粉

纯度：> 95%

等电点：7.6

应用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

规格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
检测原理：

羟化酶亚基特异性识别：抗体靶向 P4Ha1 重组蛋白抗原位点，区分羟化酶其他 α 亚型。

夹心复合物酶促显色反应：夹心免疫结构催化底物变色，信号强度正比于蛋白丰度。

标准曲线定量换算：P4Ha1 梯度标准品拟合线性模型，定量待测重组蛋白。

封闭消除背景噪声：封闭游离固相位点，减少基质杂蛋白吸附干扰检测结果。
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复溶操作要点：

复溶前准备

工具消毒：移液枪头、离心管需经过高压灭菌或一次性无菌处理，避免引入污染。

缓冲液选择：优先使用产品说明书推荐的专用复溶缓冲液，若无推荐可使用：

基础型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl

保护型：在基础缓冲液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA

特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢剂（如0.05% Triton X-100），酶类需添加辅酶因子

复溶步骤

短暂离心：将冻干蛋白管置于离心机，4℃下8000rpm离心30秒，使底部蛋白集中。

缓慢加液：沿管壁缓慢加入适量缓冲液，避免直接冲击蛋白沉淀。

温和溶解：轻轻摇晃离心管或用移液枪缓慢吹吸，禁止涡旋振荡（易导致蛋白变性）。

静置溶解：4℃静置10-30分钟，难溶蛋白可延长至1小时，期间每隔10分钟轻轻混匀一次。