大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA试剂盒

本试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附试验原理，实现大鼠戊糖素的微量定量检测。酶标板预先包被戊糖素特异性抗原，检测时样本中的戊糖素与固相抗原竞争结合限量的特异性抗体，孵育洗涤后加入酶标记物与显色底物，通过酶促反应显色。样本中戊糖素含量越高，竞争结合的抗体越少，显色越浅、吸光度越低，结合标准曲线可准确定量大鼠样本中戊糖素浓度。
基本参数‌：

产品名称：大鼠戊糖素(Pentosidine)ELISA试剂盒

英文名称：Rat Pentosidine ELISA Kit
货号：Y-E1149

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测浓度≤0.2ng/mL

检测范围：0.4ng/mL - 18ng/mL

反应时间：全程140分钟，分步温育80分钟、40分钟，显色20分钟

保存条件：2-8℃冷藏，标准品-20℃低温冻存，严禁反复冻融

有效期：试剂盒整体9个月，冻存标准品有效期3个月

特异性：精准识别大鼠戊糖素糖基化产物，与AGEs其他亚型交叉反应率＜4%

重复性：板内CV≤6%，板间CV≤8%

注意事项：老化、氧化样本会干扰检测，需使用新鲜样本；实验全程恒温，温度波动会影响抗原抗体结合效率。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。
实验步骤如下：

板条室温回温 35min，稀释戊糖素标准品设置浓度梯度，样本稀释预处理，空白孔加稀释液，每孔 50μL。

每孔添加酶标记抗原 50μL，封板避光，37℃孵育 80min。

洗板 6 轮，每轮洗液浸泡 36s，彻底清除未结合组分。

显色液 A、B 各 50μL 加入混匀，避光显色 23min。

滴加终止液 50μL 终止反应。

酶标仪 450nm 检测吸光度值。

标准曲线拟合定量，核算稀释倍率得出戊糖素浓度。
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