本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板预先包被大鼠Cyt-C特异性单克隆抗体。待测样本中的细胞色素C抗原与固相抗体特异性结合,孵育洗板后加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体,形成稳定的免疫夹心结构。后续通过酶促显色反应生成有色产物,产物浓度与样本中Cyt-C含量正相关,检测吸光度并对照标准曲线,可精准定量大鼠Cyt-C的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA试剂盒
英文名称:Cyt-C ELISA Kit
货号:Y-E1278
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.15ng/mL
检测范围:0.3ng/mL - 12ng/mL
反应时间:全程95分钟,孵育55分钟,显色25分钟
保存条件:2-8℃避光保存,标准品-20℃分装冻存
有效期:未开封8个月,标准品解冻后7天内使用
特异性:特异性检测大鼠线粒体细胞色素C,与胞质同源蛋白无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:溶血样本会释放内源Cyt-C,导致结果偏高,需严格筛选样本;实验全程无酶污染。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

酶标板室温平衡 33min,倍比稀释 Cyt-C 标准品,组织裂解液样本稀释处理,空白孔加稀释液,每孔 50μL。
每孔加入酶标记结合试剂 50μL,封板膜密封,37℃孵育 70min。
洗板 5 次,每次浸泡 34s,弃液后吸水纸拍净残液。
显色 A、B 液各 50μL 加入震荡混匀,避光显色 20min。
滴加终止液 50μL 终止显色。
10min 内 450nm 检测 OD 值。
标准曲线计算稀释后浓度,得到样本细胞色素 C 原始浓度。
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关键字: 大鼠细胞色素C;Cyt-C;ELISA试剂盒;
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