本试剂盒专为牛布鲁氏杆菌核酸检测研发，通过特异性PCR扩增体系，靶向牛源布鲁氏杆菌保守基因，可检测牛血液、乳汁、子宫分泌物、病变组织样本中的病原菌。牛布鲁氏杆菌易导致母牛流产、公牛睾丸炎，试剂盒灵敏度高，可检出低载量隐性感染样本，操作简便、结果精准。主要用于牛场布鲁氏杆菌常态化筛查、引种检疫、患病牛只确诊及人畜共患病防控。
产品名称 | 牛布鲁氏杆菌PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P013954 |
英文名称 | Brucella bovisPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
引物靶向牛种布鲁氏菌 bp26 特异性基因，荧光定量 PCR 检测牛血液、乳汁样本内致病菌核酸。
常规 PCR 扩增牛布鲁氏菌特异性插入序列，琼脂糖电泳条带阳性判定牛布鲁氏菌感染。
乳汁样本脱脂处理后磁珠富集细菌 DNA，qPCR 低拷贝菌也可稳定检出。
操作步骤：
样本处理（样本处理区）
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸，避免交叉污染。
试剂配制（试剂准备区）
反应体系（20μL/管）：19μL反应液 + 1μL酶液，分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增（核酸扩增区）
循环参数：
预变性：95℃ 2min（1循环）；
扩增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循环，60℃时采集荧光信号，FAM通道）。
结果分析
阳性：Ct值≤40，扩增曲线呈指数增长；
阴性：无Ct值或曲线平直；
可疑：40<Ct≤45，需复测确认。
质控要求：阳性质控Ct≤32，阴性质控无扩增。
注意事项：
所有试剂避免反复冻融，可分装小体积冻存；融化后冰上放置不超过 2 h，酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高，开盖全程在生物安全柜操作，防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶，枪头一次性使用；实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测，严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸，减少抑制剂干扰
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