本试剂盒专为绵羊布鲁氏菌检测设计，基于荧光PCR技术靶向菌种专属保守核酸序列，可检测绵羊血液、乳汁、生殖道分泌物、流产组织样本中的病原菌。绵羊布鲁氏菌专一性感染绵羊，易引发母羊流产、羔羊孱弱、羊群繁育能力下降，试剂盒检测精准、抗干扰能力强。适用于绵羊养殖种群疫病净化、临床感染确诊、引种检疫及绵羊专属布鲁氏菌病专项防控。
产品名称 | 绵羊布鲁氏菌PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P013959 |
英文名称 | Brucella ovisPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
qPCR 靶向绵羊布鲁氏菌特异性外膜蛋白基因，荧光定量检测绵羊乳汁、流产胎儿病料。
普通 PCR 扩增绵羊布鲁氏菌专属插入序列，电泳条带与牛、羊种布鲁氏菌区分。
染料法荧光 PCR，依靠绵羊布鲁氏菌特征熔解温度完成快速分型筛查。
操作步骤：
（一）反应体系配制（冰上操作，防酶失活与污染）
按 “水→缓冲液→dNTP→引物→模板→Taq 酶” 顺序加样（酶最后加，避免失活）。
轻轻涡旋混匀，短暂离心（3000rpm，10s），使液体沉至管底。
无热盖的 PCR 仪：加 1 滴矿物油覆盖液面，防止蒸发。
（二）PCR 程序设置（标准 35 循环）
预变性：94℃，3-5min（彻底变性模板 DNA）。
循环阶段（35 次）：
变性：94℃，30s（双链解链）。
退火：55-65℃，30s（引物结合模板，按引物 Tm 值调整）。
延伸：72℃，1min/kb（Taq 酶合成新链，1kb 片段约 1min）。
终延伸：72℃，5-10min（确保片段完整延伸）。
保温：4℃，∞（防止非特异性复性，短期保存）。
（三）产物检测（琼脂糖凝胶电泳）
制胶：1% 琼脂糖凝胶（1g 琼脂糖 + 100mL 1×TAE 缓冲液），加热融化后加核酸染料，倒胶插梳，凝固 30min。
上样：取 5μL PCR 产物 + 1μL 上样缓冲液，点样；同时加 DNA Marker（分子量对照）。
电泳：120V，20-30min，至溴酚蓝迁移至凝胶 2/3 处。
成像：凝胶成像系统观察条带，目标片段位置与预期一致则为阳性。
四、参数优化
退火温度（Tm）：引物 Tm 值 = 4×(G+C)+2×(A+T)，退火温度一般低于 Tm 值 5℃，温度过高无条带，过低非特异性条带多。
Mg²⁺浓度：1.5-2.5mM，浓度过低酶活性低、产量少；过高非特异性扩增增加。
循环数：25-35 个循环，少于 25 个产物不足，多于 35 个易出现非特异性条带。
延伸时间：按目标片段长度调整，≤1kb 用 1min，1-3kb 用 2-3min。
注意事项：
分区操作：试剂配制、样品处理、PCR扩增需在独立区域进行，避免交叉污染
无菌操作：使用带滤芯枪头、一次性手套和专用工作服
试剂准备：所有试剂使用前需完全融化，震荡混匀后短暂离心
避光保存：含荧光探针的试剂需避光保存和操作
防止污染：阳性对照操作需最后进行，实验后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作台
公司正在出售的产品：
肠道沙门氏菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人3-葡萄糖苷酸孕二醇ELISA试剂盒 |
肠杆菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 西方蜜蜂微孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 大鼠CXC趋化因子受体4ELISA试剂盒 |
肠致病性大肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 诺卡菌检测试剂盒 | 大鼠5-羟色胺转运体ELISA试剂盒 |
传染性胰脏坏死病病毒（IPNV）RNA核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法） | 星状诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人催产素受体ELISA试剂盒 |
滴虫（毛滴虫）通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 皮诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人接触蛋白2ELISA试剂盒 |
大肠弯曲杆菌、海鸟弯曲杆菌16S rRNA基因荧光PCR检测试剂盒(探针法) | 新星诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人肝癌源性生长因子ELISA试剂盒 |
带绦虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 肉色诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 绵羊布鲁氏菌PCR检测试剂盒人胱抑素BELISA试剂盒 |
单纯疱疹病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 诺卡菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人Fc受体样蛋白3ELISA试剂盒 |
达氏疏螺旋体（达氏包柔螺旋体）探针法荧光定量PCR试剂盒 | 豚鼠耳炎诺卡菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 人成纤维细胞生长因子18ELISA试剂盒 |
关键字： 绵羊布鲁氏菌;PCR检测试剂盒;
上海研生实业有限公司成立于2011年专业销售各种科学实验产品，包括分子生物学、细胞生物学、免疫学、等多个研究及应用领域。旗下有“上研生"品牌。
我们努力将欧美进口品牌的产品推荐给各类研究人员；另一方面也非常重视国内科研市场的产品开发，推出了一系列具有竞争力的产品和服务。
同时国家对于生物行业的发展给予极大的重视，更多地侧重于科研的投入。公司的服务和业务在同行获得认可。也具备丰富的管理经验，同时我们建立了集技术支持、售后服务等多方位的服务体系。我们有激情、有理想，更有责任感，是您科研道路上值得信赖的伙伴。
公司的理念是：以诚信为本，努力打造优质品牌，为您提供产品的售中、售后服务。