本试剂盒采用高灵敏度实时荧光RT-PCR技术，专属针对本迪布焦型埃博拉病毒核酸设计引物探针，可精准检测人体及动物疑似样本中的病毒RNA。该病毒为高致病性烈性传染病病毒，致死率高，试剂盒检测快速、特异性极强，可精准区分其他埃博拉病毒亚型，有效规避假阳性、假阴性结果。适用于口岸检疫、疫区排查、疑似病例快速确诊及烈性传染病应急检测工作。
产品名称 | 本迪布焦型埃博拉病毒PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P013963 |
英文名称 | Bundibugyo Ebola Virus PCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
样本病毒 RNA 一步法 RT-qPCR，靶向本迪布焦埃博拉 NP 核蛋白特异性基因，专属探针产生荧光信号分型。
巢式 RT-PCR 两轮扩增病毒 L 聚合酶基因，高灵敏度检出微量病毒 RNA，适配血液高危样本。
封闭体系直扩 RT-PCR，全程无开盖操作，避免高致病性病毒核酸气溶胶污染。
操作步骤：
样本制备：
使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。
建议DNA浓度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反应体系配制（20 μL体系示例）：
预混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特异性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
补充无核酸酶水至终体积。
PCR扩增程序：
预变性：95℃ 5分钟；
循环阶段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析：60~95℃（可选，用于验证扩增特异性）。
结果判读：
阳性：Ct值≤35且熔解曲线峰单一；
阴性：Ct值≥40或无扩增曲线；
可疑：35<Ct值<40，建议复测或结合熔解曲线分析。
注意事项：
所有耗材必须无核酸酶，吸头一次性使用，禁止重复吸取；
阳性模板拷贝浓度高，开盖操作轻柔，避免气溶胶扩散造成全域污染；
试剂融化后冰上放置不超过 2 h，用完立即放回 - 20℃；
废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃；
试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测，禁止人体临床检测；
移液器、操作台定期紫外消毒，长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。
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