产品名称:侵入性丝囊霉菌PCR检测试剂盒
英文名称:Aphanomyces invadansPCR
货号:YS-P013819
分类:PCR检测试剂盒
规格:50T/盒
检测原理:
靶向丝囊霉菌 ITS 真菌保守序列通用引物,水产养殖水体、病鱼组织普通 PCR 扩增,电泳判定霉菌感染。
SYBR Green 荧光定量 PCR,扩增菌种特有致病基因,熔解曲线区分侵入性丝囊霉与其他水生霉菌。
真菌质控双重 PCR,同步扩增真菌通用内参,校验水样核酸提取效果,排除抑制剂干扰。
实验流程:
样本处理(样本处理区)
推荐使用磁珠法或离心柱法提取核酸,避免交叉污染。
试剂配制(试剂准备区)
反应体系(20μL/管):19μL反应液 + 1μL酶液,分装后加入5μL待测核酸或质控品。
PCR扩增(核酸扩增区)
循环参数:
预变性:95℃ 2min(1循环);
扩增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循环,60℃时采集荧光信号,FAM通道)。
结果分析
阳性:Ct值≤40,扩增曲线呈指数增长;
阴性:无Ct值或曲线平直;
可疑:40<Ct≤45,需复测确认。
质控要求:阳性质控Ct≤32,阴性质控无扩增。
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注意事项:
所有试剂避免反复冻融,可分装小体积冻存;融化后冰上放置不超过 2 h,酶失活会直接导致无扩增条带
阳性质粒拷贝数极高,开盖全程在生物安全柜操作,防止气溶胶污染实验室
所有耗材必须无核酸酶,枪头一次性使用;实验后 PCR 管、废液 121℃高压灭菌后丢弃
试剂盒出现浑浊、变色、结冰分层、过期禁止使用
仅限科研检测,严禁用于人体临床疾病诊断、食品出厂检疫等合规检测场景
土壤、粪便、腐殖质样本优先使用磁珠法提取核酸,减少抑制剂干扰
关键字: 侵入性丝囊霉菌;PCR检测试剂盒;
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