本试剂盒依托PCR特异性扩增原理，靶向牛仰口线虫基因组保守序列，可检测牛粪便、肠道组织、血液样本中的虫体核酸，实现牛仰口线虫感染的分子生物学诊断。牛仰口线虫是牛常见消化道寄生虫，易引发牛贫血、消瘦、肠道损伤，试剂盒可精准检出轻度感染与隐性感染，弥补传统镜检的不足。适用于规模化牛场寄生虫筛查、感染确诊、驱虫效果评估及畜禽寄生虫病防控。
产品名称 | 牛仰口线虫PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P013964 |
英文名称 | Bunostomum phlebotomumPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
提取牛粪中线虫虫卵 DNA，qPCR 靶向牛仰口线虫 ITS 间隔区特异性序列，荧光探针检出虫体核酸。
普通 PCR 扩增线虫肌动蛋白特有基因，电泳条带区分牛仰口线虫与其他消化道线虫。
粪便虫卵富集后磁珠提纯 DNA，大幅降低粪便杂质对 PCR 扩增的抑制。
操作步骤：
1. DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容试剂盒提取样本DNA，建议浓度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 标准曲线制备（独立操作区）
标记6管为梯度稀释点（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL阳性对照依次稀释，混匀后作为标准品（避免污染）。
3. PCR反应体系配制（试剂配制区）
按以下比例配制（示例）：
| 组分 | 体积（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上机检测
程序设置：预变性95℃ 3 min；40循环（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲线分析。
数据分析：根据Ct值及标准曲线计算样本浓度。
注意事项：
1、实验分区管理
实验全程需严格划分三个独立区域：试剂准备区、样本处理区、PCR扩增区，各区实验服、移液器及耗材严禁混用，防止交叉污染。
2、防止污染操作
使用带滤芯枪头，每步更换枪头；
阳性对照操作应在专用生物安全柜中进行，避免污染其他试剂；
加样后立即盖紧管盖，避免气溶胶扩散。
3、试剂保存与使用
所有试剂需-20℃避光保存，避免反复冻融，确保稳定性；
使用前于冰上解冻并轻柔混匀，瞬时离心后使用。
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