本试剂盒基于枝孢霉属保守基因研发通用型PCR检测体系，可广谱检测卡氏枝孢霉、毛样枝孢霉等各类致病、污染性枝孢霉真菌。枝孢霉广泛分布于自然与养殖环境，易造成饲料、食材霉变，诱发畜禽及人体真菌感染。本试剂盒实现枝孢霉属真菌全覆盖筛查，无需多次单项检测，大幅提升检测效率，体系稳定性强、抗污染能力优异，适用于食品饲料安全检测、环境真菌监测、畜禽真菌病害普查等多场景。
产品名称 | 枝孢霉通用PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014021 |
英文名称 | Cladosporium spp.PCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理：
靶向枝孢霉属共有 ITS 保守序列通用引物，霉变环境、临床真菌样本 DNA PCR 广谱筛查。
通用 SYBR 荧光定量 PCR，熔解曲线可初步区分枝孢霉属下不同霉菌种类。
巢式真菌通用 PCR，两轮引物扩增提升环境微量枝孢霉核酸检出灵敏度。
操作步骤：
DNA提取（样本制备区）
使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA，确保无抑制剂残留。
标准曲线制备（样本制备区）
标记6支离心管为7至2号，每管加入45 μL DEPC-H2O（需使用带滤芯枪头）。
梯度稀释阳性对照：
7号管：加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照，震荡混匀，得1×10^7拷贝/μL标准品；
依次稀释至2号管，最终浓度跨5个数量级（1×10^7至1×10^3拷贝/μL）。
所有标准品置于冰上备用，避免反复冻融。
试剂配制（试剂准备区）
反应液避光解冻后涡旋混匀，短暂离心分装至PCR管。
每反应体系20 μL，含预混引物、荧光染料及缓冲液。
加样（样本处理区）
分别加入5 μL待测DNA或标准品至反应管，阴性对照以DEPC-H2O替代。
盖紧管盖，避免气泡干扰。
PCR扩增（核酸扩增区）
按以下程序运行定量PCR仪：
预变性：95℃ 2分钟；
循环阶段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号）；
熔解曲线分析（可选）。
注意事项：
试剂盒含生物源性质粒模板，操作全程佩戴手套、口罩，阳性模板仅在生物安全柜开盖；
所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃；
试剂避免反复冻融，单次融化冰上放置不超过 2 h，使用完毕立即放回 - 20℃；
移液器吸头一次性使用，禁止重复吸取，防止交叉污染；
试剂盒仅用于科研检测，严禁人临床体外诊断；
扩增产物区产物不可带回试剂、提取区，防止气溶胶大面积污染实验室；
若阴性对照持续出现杂带，全部更换全新试剂盒，实验室台面、移液器紫外过夜消毒。
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