本试剂盒基于荧光PCR技术,精准检测溶血梭状芽孢杆菌核酸,适配畜禽血液、组织、粪便及环境样本。溶血梭状芽孢杆菌可引发畜禽溶血性感染、败血症、肠道出血等重症,发病迅猛、致死率高,传统检测周期长,延误诊疗时机。本试剂盒检测快速、灵敏度高,可实现早期感染快速筛查,特异性优异,可精准区分各类梭状芽孢杆菌,为畜禽溶血类疫病的病因确诊、精准用药、疫情防控提供关键技术支撑。
产品名称 | 溶血梭状芽孢杆菌PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P014031 |
英文名称 | Clostridium haemolyticumPCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:

动物病变组织核酸提取,溶血梭菌溶血毒素基因特异性引物 PCR,电泳判定致病菌。
单重荧光探针 qPCR,探针靶向溶血毒素编码区,精准区分非溶血型梭状芽孢杆菌。
芽孢富集耦合 PCR,试剂盒裂解液高效破碎芽孢,释放微量基因组 DNA 完成扩增。
操作步骤:

样本制备:
使用CTAB法或商业DNA提取试剂盒从组织中提取基因组DNA。
建议DNA浓度≥20 ng/μL,A260/A280比值1.8~2.0。
反应体系配制(20 μL体系示例):
预混PCR Master Mix(含染料、dNTPs、Taq酶等)
特异性引物混合液
模板DNA(2~5 μL)
补充无核酸酶水至终体积。
PCR扩增程序:
预变性:95℃ 5分钟;
循环阶段(40~45 cycles):95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
熔解曲线分析:60~95℃(可选,用于验证扩增特异性)。
结果判读:
阳性:Ct值≤35且熔解曲线峰单一;
阴性:Ct值≥40或无扩增曲线;
可疑:35<Ct值<40,建议复测或结合熔解曲线分析。
注意事项:

所有耗材必须无核酸酶,吸头一次性使用,禁止重复吸取;
阳性模板拷贝浓度高,开盖操作轻柔,避免气溶胶扩散造成全域污染;
试剂融化后冰上放置不超过 2 h,用完立即放回 - 20℃;
废弃 PCR 管、扩增产物、实验废液统一 121℃高压灭菌后丢弃;
试剂盒仅用于动植物、水产、微生物疫病科研检测,禁止人体临床检测;
移液器、操作台定期紫外消毒,长期污染需更换全新试剂盒全套试剂。
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关键字: 溶血梭状芽孢杆菌;PCR检测试剂盒;
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