东部马脑脊髓炎病毒PCR检测试剂盒 新品

本试剂盒针对东部马脑脊髓炎病毒特异性基因设计PCR扩增体系，可精准检测马类、媒介蚊虫样本中的病毒核酸。产品灵敏度高、生物安全性好，能够早期筛查马脑脊髓炎病毒感染，适用于马属动物疫病诊断、虫媒病毒监测和畜牧养殖疫情防控。

基础原理：

血清 RNA 逆转录，靶向病毒 E2 包膜基因 RT-PCR 特异性筛查蚊传脑炎病毒。

一步法 Taqman 荧光 RT-qPCR，探针结合病毒 NS1 基因，微量血浆病毒可检出。

患者脑脊液提取总 RNA 逆转录，病毒特异性引物扩增条带判定感染。

‌操作步骤‌：

1. 样本处理

提取待测样本RNA，建议使用商品化RNA提取试剂盒。

2. 阳性对照稀释（示例：6个梯度）

标记离心管（7至2号），每管加入45μL模板稀释液。

按10倍梯度稀释阳性对照，避免交叉污染。

3. PCR反应体系配制（20μL/反应）

| 组分 | 体积（μL） |

| RT-PCR反应液 | 10 |

| 荧光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 补至20 |

4. 上机程序

逆转录：50℃ 15分钟（可选，根据病毒RNA特性调整）。

预变性：95℃ 2分钟。

循环：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集荧光信号），共40循环。

‌注意事项‌：

避免反复冻融试剂，解冻后需充分混匀。

实验环境需严格分区（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止污染。

阳性对照需与样本分装操作。

本产品仅限科研用途，不可用于临床诊断。

操作时需穿戴防护装备，避免试剂接触皮肤或眼睛。

样本采集需遵循无菌原则，运输时使用干冰或冰袋保存。

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