3,6-二甲基-1,2,4,5-四嗪

一、蛋白质标记与成像

1. 活细胞蛋白质标记：北京大学陈鹏课题组首次在活细胞蛋白质上实现了基于该化合物的狄尔斯-阿尔德反应，用于蛋白质的激活与标记。

2. 蛋白质相互作用研究：将四嗪标记一种蛋白质，TCO标记另一种蛋白质，通过点击反应形成共价连接，结合荧光共振能量转移技术研究蛋白质间相互作用。

3. 细胞表面受体标记：通过TCO修饰的抗体或肽链标记细胞表面受体，再用四嗪-荧光染料探针进行快速荧光成像。

二、细胞与免疫标记

1. T细胞动态追踪：将Tetrazine-PEG-SS-NHS酯修饰的CD8抗体与TCO修饰的荧光染料（如Cy5）偶联，实时监测CAR-T细胞在肿瘤组织中的浸润与扩增。

2. 细胞膜工程改造：DSPE-PEG2k-TZ可插入细胞膜，通过四嗪-TCO反应将CRISPR-Cas9复合物等功能分子锚定于细胞膜，实现时空精准控制。

三、疾病模型与代谢成像

1. 阿尔茨海默病tau蛋白检测：利用四嗪-TCO反应标记醛基化的代谢物（如氧化应激产生的4-HNE修饰蛋白），在疾病模型中实现tau蛋白异常聚集的早期检测，灵敏度达5 pM。

2. 肿瘤微环境响应释放：结合pH敏感型磷脂，构建酸响应纳米颗粒，在肿瘤酸性环境中暴露四嗪基团，与TCO-药物结合实现病灶特异性释放。

四、多模态成像与诊疗一体化

1. 多模态成像引导治疗：通过四嗪基团连接磁共振造影剂（如Gd-DOTA）和近红外荧光探针（如ICG），构建“诊疗一体化”纳米颗粒，肿瘤部位信号强度可达传统试剂的3倍以上。

2. 活体动物动态成像：AF488 tetrazine等探针可在活体动物中实现对特定分子或细胞的动态追踪，避免传统催化剂（如铜离子）的毒性。

五、核酸与多糖标记

1. 基因表达与转录研究：将四嗪修饰的荧光核苷酸掺入新合成的RNA链，通过荧光信号追踪RNA转录和转运过程。

2. DNA损伤与修复研究：在DNA损伤部位引入TCO修饰物，通过四嗪点击反应连接荧光标记物，直观观察损伤位置和修复过程。

3. 细胞表面多糖标记：通过四嗪点击化学将标记物连接到细胞表面多糖，研究细胞识别与黏附机制。

六、药物开发与靶向递送

1. 抗体药物偶联物构建：利用Tetrazine-PEG-MAL等双功能试剂，在抗体上通过巯基与马来酰亚胺偶联，再通过四嗪与TCO-细胞毒药物点击结合，制备高均一度的ADC。

2. 靶向多肽药物构建：修饰含巯基多肽或药物分子，四嗪端连接靶向配体，构建靶向递送系统。