茎瘤固氮根瘤菌 新品

商品属性：

产品描述：

茎瘤固氮根瘤菌（Azorhizobium caulinodans）是固氮根瘤菌属的革兰氏阴性杆菌，具周生鞭毛，运动活泼，严格好氧。它能与热带豆科植物（如田菁）形成共生固氮体系，不仅可在根部形成根瘤，还能在茎部形成茎瘤，将空气中的氮气转化为氨，为植物提供氮源，促进植物生长，提高土壤肥力，是研究微生物-宿主共生关系和基因表达调控的重要模式菌株，可作为生物肥料接种剂用于农业生产。
培养基  蛋白胨：10.0，牛肉粉：3.0，氯化钠：5.0，琼脂：15.0，pH值：7.3±0.1(25℃)

生长条件  30℃；48-72h；好氧

存储条件  2-8℃

安全等级  1

形态  菌落直径为0.5-1mm，圆形，边缘整齐，不透明，正面灰白色，中间凸起，表面灰暗，表面光滑，质地湿润，易挑起，G－（红），杆菌

分离基物  Sesbania rastrata stem nodules isolate

模式菌株  yes

操作步骤  ①准备上述平板 1-2 块；②安瓿管表面消毒后在安全柜中打开，用酒精灯灼烧顶部，后迅速滴上无菌水使之破裂，随后用镊子将其敲碎；③吸取 0.5mL 无菌水打入冻干管，充分溶解菌粉后，打入平板中 200μL/个，涂布均匀；④将平板置于上述培养条件下培养，菌种长出即可使用。

共享方式  公益性共享

复活步骤:

甘油管冻存菌株复活

超净工作台内，用无菌移液器吸取1-2ml适宜的液体培养基至无菌试管中。

用无菌枪头吸取0.1-0.2ml冻存菌株菌液，加入上述液体培养基中，轻轻吹打混匀。

试管封口后，置于对应温度的恒温摇床（细菌180-220rpm，真菌120-150rpm）中培养12-24小时，或静置培养箱中培养24-48小时，至培养基出现明显浑浊。

取少量复苏后的菌液，涂布于固体培养基平板上，倒置培养至单菌落长出，后续可进行纯化保存。

冻干管菌株复活

超净工作台内，用75%酒精擦拭冻干管外壁，火焰灼烧管口（注意避免灼伤），然后用无菌镊子轻轻敲开冻干管。

吸取0.5-1ml无菌液体培养基，缓慢加入冻干管中，轻轻振荡使冻干菌粉完全溶解。

将溶解后的菌液全部转移至装有5-10ml液体培养基的无菌三角瓶中，充分混匀。

三角瓶封口后，置于最适温度的摇床或培养箱中培养，培养时间根据菌株类型调整（细菌12-24小时，真菌24-72小时）。

待培养基浑浊后，取菌液涂布固体平板，进行单菌落分离纯化。

准备工作：

环境与器材消毒：

在生物安全柜或超净工作台中操作。提前打开紫外灯照射30分钟。

准备75%酒精喷洒双手和工作台面。

准备所需器材：无菌接种环、酒精灯、无菌吸管、涂布棒、试管架、打火机等。

培养基准备：

根据菌种类型选择合适的培养基（如营养琼脂、血平板、LB培养基等）。

将培养基从冰箱取出，恢复至室温或进行预热。

个人防护：

穿戴实验服、手套、口罩。需在生物安全柜中操作并佩戴护目镜。

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