大鼠海绵体内皮细胞

大鼠海绵体内皮细胞

细胞简介：

大鼠海绵体内皮分离自海绵体组织；阴茎海绵体是由海绵状的小梁和腔隙构成的血窦结构，它主要包括海绵体内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞3种细胞成分。其中平滑肌细胞和成纤维细胞镶嵌于海绵体细胞外基质的胶原中，而海绵体内皮细胞则覆盖于海绵体血窦的腔面，仅占海绵体组织的2.8%。在消化海绵体组织时，胶原酶的作用主要是松解海绵体内皮细胞与基膜的联系，破坏海绵体内皮细胞间的紧密连接。如果消化时间延长或胶原酶浓度过大，平滑肌细胞和成纤维细胞也将被消化下来，从而影响海绵体内皮细胞的纯度。因此，比较筛选合适的胶原酶浓度和消化时间是成功分离海绵体内皮细胞的关键。

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

 产品信息：

英文名称：Rat Cavernous Endothelial Cells

组织来源：海绵体组织

默认种属 大鼠

产品规格 5×10^5Cells/T25

方法简介 公司实验室分离的大鼠海绵体内皮采用混合酶消化法结合机械分离法、并用内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测  公司实验室分离的大鼠海绵体内皮经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞培养操作：

1. 细胞复苏

运输与接收：细胞以液氮冻存形式运输，收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶，置于超净台内无菌操作。

复苏操作：将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态，显微镜下观察细胞形态和密度，记录初始状态（建议40x、100x、200x各拍一张照片）。

2. 细胞传代

传代时机：当细胞密度达80%汇合度时进行传代。

操作步骤：

弃去旧培养基，用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分钟，显微镜下观察细胞变圆脱落。

加入5 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打使细胞完全脱落。

离心（1000 RPM，5分钟），弃上清，用1-2 mL培养基重悬。

按1:2比例分瓶传代（如T25瓶分至两个T25瓶），补充新鲜培养基至5 mL。

换液频率：每2-3天换液一次。

3. 细胞冻存

冻存液：使用无血清冻存液。

冻存步骤：细胞传代后，用胰蛋白酶消化并离心，重悬于冻存液，缓慢降温至-80℃，最终转入液氮长期保存。

公司正在出售的产品：

高度生理相关性：保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。

有限寿命：与无限增殖的肿瘤细胞系不同，原代细胞增殖能力有限，经过一定次数的分裂后会进入衰老期，这更符合正常细胞的生理状态。

异质性：初始培养物通常是多种细胞类型的混合物，有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。

操作要求高：对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格，培养难度大于永生化细胞系。