大鼠肾小管上皮细胞
产品信息：
英文名称 | Rat Renal Tubular Epithelial Cells | 种属 | 大鼠 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X1587 |
组织来源 | 肾组织 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介：
大鼠肾小管上皮分离自肾组织；肾脏是机体的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物，同时经重吸收功能保留水份及其他有用物质，如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、等，以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能，生成肾素、促红细胞生成素、活性3、前列腺素、激肽等，又为机体部分内分泌激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能，保证了机体内环境的稳定，使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一条细长上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分；近端小管可分为直部和曲部，曲部也称为近曲小管，位于皮质迷路内，于肾小体附近高度蟠曲；远端小管曲部也称为远曲小管，位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管外面的一层细胞，肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏疾病的一项重要技术，目前该分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能：①肾小管上皮细胞重吸收原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非营养物质进入终尿；③细胞能分泌炎症介质如细胞因子和趋化因子，通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反应；④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2R和MHC-Ⅱ类抗原，这说明肾小管上皮细胞参与肾免疫损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加深，肾小管上皮细胞（RTECs）在其中的作用日益被人们重视。因此，提供良好的肾小管上皮细胞模型，在肾小管间质疾病的发病机制和治疗药物筛选的研究中是非常重要的。
方法简介 公司实验室分离的大鼠肾小管上皮采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾小管、后用胶原酶消化，结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠肾小管上皮经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息：
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作技巧与注意事项：
成功的原代培养依赖于严谨的细节控制：
严格无菌操作：这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行，试剂和耗材必须无菌。
保持静置：细胞接种后的最初24-48小时内，应保持培养瓶绝对静置，避免频繁取出观察或晃动，这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程：
消化时间要恰到好处，过长会损伤细胞，过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小，常用于分离活性要求高的细胞；胰蛋白酶作用较强，需严格控制时间。
酶液应新鲜配制，避免活性下降。
控制接种密度：原代细胞在低密度下不易存活，建议适当提高初始接种密度，以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液：根据培养基颜色变化（如变黄）或每隔2-3天更换一次培养液，以清除代谢废物并补充营养。
公司正在出售的产品：
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细胞培养操作
消化培养法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）将组织分散成单个细胞或细胞团，形成细胞悬液进行培养，细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织，并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块（约 1 mm3），以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中，加入适量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟，期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察，当组织分散成细胞团或单个细胞时，立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
将细胞悬液通过筛网过滤，除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟，弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀，进行细胞计数，并调整细胞密度至实验所需浓度（例如 5×10 cells/mL）。
将细胞悬液分装至培养瓶中，放入 37℃、5% CO培养箱中静置培养。
关键字： 大鼠肾小管上皮细胞;肾组织;贴壁;
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