大鼠脐静脉内皮细胞
产品信息:

英文名称 | Rat Umbilical Vein Endothelial Cells | 种属 | 大鼠 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X1756 |
组织来源 | 脐带组织 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介:

大鼠脐静脉内皮分离自脐带组织;它是脐静脉的重要结构组成细胞之一,在机体的正常生理过程中发挥着重要作用。脐带是哺乳类的连接胎儿和胎盘的管状结构,脐带中通过尿膜的血管即脐动脉和脐静脉,卵黄囊的血管即脐肠系膜动脉及脐肠系膜静脉。在子宫中,子宫动脉在胎盘的母体部分出的毛细血管,与胎盘的子体部胎儿毛细血管靠近,在此处母体和胎儿的血液间进行CO2和O2,代谢产物即代谢废物和营养物质的交换。脐动脉将胎儿产生的废物运送至胎盘,脐静脉将O2和营养物质从胎盘运送给胎儿。
方法简介 公司实验室分离的大鼠下腔静脉内皮采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法、并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠脐静脉内皮经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传3代左右
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
关键操作技巧与注意事项:

成功的原代培养依赖于严谨的细节控制:
严格无菌操作:这是实验成功的基石。所有操作需在生物安全柜中进行,试剂和耗材必须无菌。
保持静置:细胞接种后的最初24-48小时内,应保持培养瓶绝对静置,避免频繁取出观察或晃动,这有助于细胞贴壁和伸展。
优化消化过程:
消化时间要恰到好处,过长会损伤细胞,过短则细胞分散不佳。
胶原酶对组织的损伤较小,常用于分离活性要求高的细胞;胰蛋白酶作用较强,需严格控制时间。
酶液应新鲜配制,避免活性下降。
控制接种密度:原代细胞在低密度下不易存活,建议适当提高初始接种密度,以保证细胞间的相互作用促进其生长。
定期换液:根据培养基颜色变化(如变黄)或每隔2-3天更换一次培养液,以清除代谢废物并补充营养。
公司正在出售的产品:

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细胞培养操作

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm3),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10 cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO培养箱中静置培养。
关键字: 大鼠脐静脉内皮细胞;脐带组织;贴壁;
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