A01X1998
产品信息:

英文名称:Mouse Retinal Precursor Cells
组织来源:视网膜组织
默认种属 小鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
方法简介 公司实验室分离的小鼠视网膜前体采用消化法结合专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的小鼠视网膜前体经Nestin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
细胞简介:

小鼠视网膜前体分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处多。层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力强。
培养信息:

培养基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 半贴半悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
细胞培养操作:

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm3),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10 cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO 培养箱中静置培养。
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获取与培养的挑战:
尽管价值巨大,但原代细胞的研究和应用也面临着显著的挑战:
获取困难:需要从新鲜组织中分离,对取材时间(通常在4-6小时的黄金窗口期内)、无菌操作和组织活性都有极高要求。
培养苛刻:原代细胞非常脆弱,需要特定的、成分复杂的培养基和生长因子,对培养环境(如温度、pH值)极为敏感。
批次差异:由于来源于不同的供体,不同批次的细胞在遗传背景和生理状态上存在固有差异,这给实验的可重复性带来了挑战。
成本高昂:从获取、分离到培养,整个过程耗时、费力且昂贵。
关键字: 小鼠视网膜前体细胞;视网膜组织;贴壁;
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