兔肾小球系膜细胞
产品信息:

英文名称 | Rabbit Glomerular Mesangial Cells | 种属 | 兔 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X2080 |
组织来源 | 肾 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介:

兔肾小球系膜分离自肾小球组织;肾小球是肾元中的用于将血液过滤生成原尿的一团毛细血丛,被鲍氏囊所包裹,是尿液形成的重要构造。血液经由入球小动脉进入肾小球。肾小球内的微血管不像其他微血管,汇流入静脉,而是流入出球小动脉。在肾小球内,微血管受到高压,而加速了超滤作用(hyperfiltration)的进行。微血管中的血液经由超滤作用之后,形成滤液,渗入鲍氏囊内。肾小球与鲍氏囊合称为肾小体,肾小球的过滤速率便称为肾小球过滤率。肾小球系膜是位于肾小球毛细血管袢之间的一种特殊间充质,由系膜细胞和系膜基质组成。肾小球系膜细胞是肾小球内非常活跃的细胞,具有分泌细胞基质、产生细胞因子、吞噬和清除大分子物质及类似平滑肌细胞收缩的功能。肾小球系膜细胞增生和基质的过多产生是多种肾小球肾炎的主要病理表现。肾小球系膜细胞的培养是研究系膜扩张、瘢痕形成和肾小球硬化的理想方法。系膜细胞的主要作用可能有:①收缩作用,入球小动脉和出球动脉的收缩作用受系膜细胞的调节,以影响毛细血管袢的内压和滤过率;②支持作用,它填充于毛细血管袢之间,支持毛细血管的位置;③吞噬作用,能吞噬被阻留在基膜内的大分子物质和蛋白质;④分泌肾素,在肾缺血或免疫复合物沉积时,系膜细胞增生且分泌肾素。
方法简介 实验室分离的兔肾小球系膜采用机械研磨法结合不同孔径不锈钢网筛过滤后使用胶原酶消化制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测 实验室分离的兔肾小球系膜经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

包被条件:PLL(0.1mg/ml)
培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传1-2代
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔肾小球系膜体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
与细胞系的主要区别:

特征 原代细胞 永生化细胞系 (如HeLa细胞)
来源 直接从生物体组织分离 通常经过基因改造或来源于癌组织
寿命 有限,受海弗利克极限限制 无限,可无限增殖(永生化)
遗传背景 稳定,保留供体特征 不稳定,易发生遗传漂变
生理相关性 高,更接近体内真实情况 较低,可能丢失组织特异性特征
培养难度 高,对培养条件要求苛刻 低,易于培养和维持
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细胞培养操作

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm3),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10 cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO培养箱中静置培养。
关键字: 兔肾小球系膜细胞;肾;贴壁;
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