兔睾丸间质细胞
产品信息:

英文名称 | Rabbit Testicular Mesenchymal Cells | 种属 | 兔 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X2127 |
组织来源 | 睾丸 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞简介:
兔睾丸间质分离自睾丸组织;睾丸间质细胞成群分布在曲精小管之间,胞体呈圆形,椭圆形或不规则形,胞体较大,直径约20μm,胞质呈嗜酸性,细胞核呈圆形或卵圆形,常位于中央,染色较淡,有1-2个核仁线粒体多,呈管嵴状,无分泌颗粒。从青春期开始,睾丸间质细胞受垂体前叶嗜碱性细胞分泌的间质细胞刺激素(黄体生成素)的作用,能合成分泌雄性激素,可促进的发生和男性生殖器官发育,以及维持性征和性功能。
方法简介 实验室分离的兔睾丸间质采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测 实验室分离的兔睾丸间质经3β-HSD免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基:含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态佳
消化液:0.25%
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%
兔睾丸间质体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的佳培养状态。
与细胞系的主要区别:

特征 原代细胞 永生化细胞系 (如HeLa细胞)
来源 直接从生物体组织分离 通常经过基因改造或来源于癌组织
寿命 有限,受海弗利克极限限制 无限,可无限增殖(永生化)
遗传背景 稳定,保留供体特征 不稳定,易发生遗传漂变
生理相关性 高,更接近体内真实情况 较低,可能丢失组织特异性特征
培养难度 高,对培养条件要求苛刻 低,易于培养和维持
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细胞培养操作

消化培养法
此方法利用酶(如胰蛋白酶、胶原酶)将组织分散成单个细胞或细胞团,形成细胞悬液进行培养,细胞生长较快。
取材与剪切
同样在无菌条件下获取组织,并用Hanks液清洗干净。
将组织剪切成更小的碎块(约 1 mm3),以便酶更好地发挥作用。
酶消化
将组织块转移至容器中,加入适量的酶消化液(如0.25%胰蛋白酶)。
在 37℃ 条件下消化 20-40分钟,期间可适当摇动或吹打。消化程度需在显微镜下观察,当组织分散成细胞团或单个细胞时,立即终止消化。
终止与洗涤
加入含血清的培养液以终止酶的消化作用(血清可抑制胰蛋白酶活性)。
将细胞悬液通过筛网过滤,除去未消化的组织块。然后以 1000 rpm 离心 5-10分钟,弃去上清液。
接种与培养
用适量新鲜培养液重悬细胞沉淀,进行细胞计数,并调整细胞密度至实验所需浓度(例如 5×10 cells/mL)。
将细胞悬液分装至培养瓶中,放入 37℃、5% CO培养箱中静置培养。
关键字: 兔睾丸间质细胞;睾丸;贴壁;
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