HET-1A人食管上皮细胞专用培养基
商品属性：
产品名称 | HET-1A人食管上皮细胞专用培养基 |
英文名称 | HET-1A细胞专用培养基 |
规格 | 500ML |
货号 | P-X122 |
产品介绍：
HET-1A细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持HET-1A细胞最佳的生长状态。
本产品中已包含HET-1A细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于HET-1A细胞的培养。
产品主要成分
BEGM kit培养基
备注：培养基包含（A+B）
A： BEBM 基础培养基 500ML
B: 细胞生长添加剂 一套（包含下列试剂）
● BPE, 2.0 ml ● Hydrocortisone, 0.5 ml ● hEGF, 0.5 ml
● Epinephrine, 0.5ml ● Insulin,0.5 ml ● Transferrin, 0.5 ml
● Triiodothyronine, 0.5 ml ● Retinoic Acid, 0.5 ml ● GA, 0.5ml
运输和保存
运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法： 基础培养基2℃～8℃，培养添加剂 -20℃，避光，保存12个月。配置好的完全培养基2℃～8℃保存1-2个月。
质量控制
检测项目 | 质量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
内毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
无菌检测 | 细菌 | 阴性 |
真菌 | 阴性 |
支原体 | 阴性 |
细胞生长试验 | 细胞形态 | 正常 |
细胞生长实验 | 合格 |
实验原理：
以BEGM培养基为基础，添加10%优质胎牛血清和1%抗生素，模拟人食管上皮细胞的生长环境，为HET-1A细胞提供充足的营养物质和能量，支持细胞的贴壁生长和增殖，维持细胞的食管上皮细胞特性，用于食管疾病的研究和药物筛选。
培养基配置步骤：
1. 配置前准备
试剂与耗材：MEM培养基粉末（或液体）、优质胎牛血清、青霉素-链霉素混合液、5-溴-2'-脱氧尿苷（可选）、无菌超纯水、0.22μm无菌滤膜、无菌血清瓶、移液枪、无菌移液管等
无菌环境：超净工作台提前开启紫外灯照射30分钟消毒，实验人员佩戴无菌手套、口罩，操作前用75%酒精擦拭双手和工作台
2. 基础培养基配置（以粉末MEM为例）
按照MEM培养基说明书的比例，将适量培养基粉末加入到装有900ml无菌超纯水的无菌烧杯中
用磁力搅拌器充分搅拌，直至培养基粉末完全溶解
加入适量碳酸氢钠粉末（根据说明书调整），调节培养基pH值至7.2-7.4
将溶液通过0.22μm无菌滤膜过滤除菌，转移至无菌血清瓶中，标注“MEM基础培养基”及配置日期
3. 完全培养基配置
在无菌条件下，向MEM基础培养基中加入100ml优质胎牛血清（使血清终浓度为10%）
加入10ml青霉素-链霉素混合液（使双抗终浓度为1%）
若需要筛选TK-细胞，加入5-溴-2'-脱氧尿苷，使其终浓度为0.015mg/ml
轻轻摇晃血清瓶，使各成分充分混合，标注培养基名称及配置日期
4℃避光保存，使用前提前放置至室温
4. 培养基质量检测
配置完成后，取少量培养基接种于无菌培养瓶中，37℃、5%CO₂培养箱中培养24-48小时
观察培养基是否浑浊、有无菌落生长，确认无菌后方可用于细胞培养
性能检测与验证方法：
1. 无菌与内毒素检测
无菌检测：将培养基接种于细菌/真菌培养基，37℃培养14天，观察是否有菌落生长
内毒素检测：采用鲎试剂法或动态浊度法，定量检测培养基中内毒素含量
2. 细胞培养验证
细胞生长曲线：接种相同数量细胞，每天计数细胞数量，绘制生长曲线，评估培养基对细胞增殖的促进作用
形态学观察：定期用显微镜观察细胞形态，判断是否保持正常生长状态
标志物检测：通过免疫荧光、流式细胞术等方法检测细胞特异性标志物表达情况
功能实验：针对不同细胞类型设计特定功能实验，如内皮细胞血管形成实验、T细胞杀伤实验等
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