BT-474人乳腺导管癌细胞专用培养基

产品介绍：

BT-474细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持BT-474细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含BT-474 细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于BT-474 细胞的培养。

产品主要成分

RPMI-1640 基础培养基    445 ml

特级胎牛血清    50 mL

牛胰岛素    10ug/ml

P/S青霉素-链霉素    5 mL

运输和保存

运输     ：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法     ：2℃～8℃，避光，保存1个月；-20℃，避光，保存3个月。
质量控制

实验原理：

以RPMI-1640培养基为基础，添加10%优质胎牛血清和1%抗生素，模拟人乳腺导管癌细胞的生长环境，为BT-474细胞提供充足的营养物质和能量，支持细胞的贴壁生长和增殖，维持细胞的激素受体表达特性，用于乳腺癌的研究和药物筛选。该细胞株携带BRCA1 5382C突变纯合和后天的TP53突变，可用于乳腺癌发病机制的研究。

细胞培养步骤：

1. 细胞复苏

冻存管37℃水浴1-2min解冻，转移至超净台消毒，将细胞悬液加入含4ml培养基的离心管。

1000rpm离心3min弃上清，加1-2ml培养基重悬，接种至培养瓶，补液至6-8ml，37℃、5%CO₂培养箱培养过夜，次日换液观察。

2. 细胞传代

细胞密度达80%-90%时，弃旧培养基，用PBS润洗1-2次。

加1ml消化液浸润细胞，37℃消化1-3min，细胞变圆脱落时加2-3ml培养基终止消化，吹打形成单细胞悬液。

1000rpm离心5min弃上清，加1-2ml培养基重悬，按1:2比例接种至新培养瓶，补液至8ml，培养箱培养。

3. 细胞冻存

弃旧培养基，PBS润洗1次，加1ml消化液消化，细胞脱落后加培养基终止，吹打形成悬液转移至离心管。

1000rpm离心5min弃上清，PBS清洗1次，离心后弃液。

加无血清冻存液调整细胞密度至5×10⁶～1×10⁷/ml，分装至冻存管。

程序降温盒中-80℃冷冻24h后，转移至液氮罐长期储存。

公司正在出售的产品：

注意事项：

无菌操作 全程超净台操作，避免交叉污染；培养基出现浑浊、沉淀立即弃用。

温度控制 使用前必须 37℃预热，禁止直接冷培养基培养，避免细胞脱落、凋亡。

消化控制 产品对胰酶敏感，严格控制消化时间（1~3min），过度消化导致细胞损伤。

血清依赖 禁止使用＜10% FBS 培养，劣质血清会导致 AR/PSA 表达丢失、生长停滞。

雄激素实验 若开展雄激素相关实验，需更换为无酚红 RPMI-1640+10% 活性炭处理血清（CD-FBS），避免酚红弱雌激素干扰。

仅限科研 本产品仅用于科研实验，不可用于临床诊断、治疗。