K1(GLAG-66)人甲状腺癌细胞专用培养基
商品属性：
产品名称 | K1(GLAG-66)人甲状腺癌细胞专用培养基 |
英文名称 | K1(GLAG-66)细胞专用培养基 |
规格 | 125ML、500ML |
货号 | P-X176 |
产品介绍：
K1(GLAG-66)细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持K1(GLAG-66)细胞最佳的生长状态。
本产品中已包含K1(GLAG-66) 细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于K1(GLAG-66) 细胞的培养。
产品主要成分
F12K 基础培养基 445 ml
特级胎牛血清 50 ml
P/S青霉素-链霉素 5 ml
运输和保存
运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法： 2℃～8℃，避光，保存2个月；-20℃，避光，保存6个月。
质量控制
检测项目 | 质量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
内毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
无菌检测 | 细菌 | 阴性 |
真菌 | 阴性 |
支原体 | 阴性 |
细胞生长试验 | 细胞形态 | 正常 |
细胞生长实验 | 合格 |
实验原理：
以RPMI-1640培养基为基础，添加10%优质胎牛血清和1%抗生素，模拟人甲状腺癌细胞的生长环境，为K1细胞提供充足的营养物质和能量，支持细胞的贴壁生长和增殖，维持细胞的甲状腺癌特性，用于甲状腺癌的研究和药物筛选。
使用方法：
1. 培养基配制（若为干粉或基础培养基）
将500ml基础培养基溶解于适量超纯水中，搅拌均匀。
依次加入5ml生长添加剂、10ml特级胎牛血清和5ml双抗，轻轻摇匀。
用无菌滤膜（0.22μm孔径）对混合后的培养基进行过滤除菌，转移至无菌容器中备用。
2. 细胞培养操作
（1）复苏细胞
将含有1ml细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中，轻轻摇晃加速解冻。
解冻后，将细胞悬液转移至无菌离心管中，加入4ml完全培养基混合均匀。
1000rpm离心3min，弃去上清液，加入1-2ml完全培养基重悬细胞。
将细胞悬液接种至T25培养瓶或6cm培养皿中，补充适量完全培养基，置于37℃、5%CO₂培养箱中培养过夜，第二天换液并检查细胞密度。
（2）传代培养
当细胞密度达到80%-90%时，进行传代操作。首先弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入1ml消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3min，显微镜下观察细胞大部分变圆并脱落时，迅速拿回操作台。
轻敲培养瓶，加入2-3ml完全培养基终止消化，轻轻吹打制成单细胞悬液。
将细胞悬液转移至无菌离心管，1000rpm离心5min，弃去上清液，加入1-2ml完全培养基重悬细胞。
按1:2的比例将细胞悬液接种至新的培养瓶或培养皿中，补充完全培养基至8ml，置于培养箱中继续培养。
（3）细胞冻存
待细胞生长状态良好时，收集细胞悬液，1000rpm离心4min，弃去上清液，用PBS清洗一遍。
加入无血清冻存液，调整细胞密度至5×10⁶～1×10⁷/mL，轻轻混匀。
将细胞悬液分装至冻存管中，每管1ml，做好标记。
将冻存管放入-80℃冰箱预冻24h后，转入液氮罐中长期储存。
注意事项：
整个操作过程必须严格遵守无菌操作规范，避免细菌、真菌等微生物污染培养基和细胞。
运输用的灌液培养基不能再用于培养细胞，收到细胞后需更换为按照说明书新配制的完全培养基。
为保证细胞存活率，收到冻存细胞后请立即解冻复苏，若无法立即操作，冻存细胞可在-80℃条件下保存1个月。
首次传代建议采用1:2的传代比例，后续可根据细胞生长情况调整传代比例。
产品仅供科学研究使用，不可用于动物或人类疾病的治疗及临床诊断。
公司正在出售的产品：
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人结直肠腺癌细胞；Caco-2 | 溶质载体家族26成员4(SLC26A4)ELISA试剂盒 |
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