人腹膜微血管内皮细胞
细胞简介:

腹膜是指在存在高等脊椎动物腹腔中的一层浆膜,主要由间皮及其外面的结缔组织构成。腹膜包覆大部分腹腔内的器官,能分泌黏液润湿脏器的表面,减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、和神经组织经由腹膜与外界相连。腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。
微血管内皮细胞呈单层覆盖于微血管表面,构成血管内外物质交换的一种重要屏障,是循环血流动力和血液中危险因素的主要靶点。
人腹膜微血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态
细胞特性:

1)组织来源于手术后的腹膜组织。
2)细胞鉴定:vWF与角蛋白荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。
5)细胞生长方式:铺路石样细胞,不规则细胞,贴壁培养。
产品信息:

英文名称 | Primary human peritoneal microvascular endothelial cells | 种属 | 人 |
产品规格 | 5×10^5Cells/T25 | 货号 | A01X1321 |
组织来源 | 腹膜组织 | 生长特性 | 贴壁 |
细胞培养操作:

1. 细胞复苏
运输与接收:细胞以液氮冻存形式运输,收到后立即用75%酒精喷洒消毒细胞瓶,置于超净台内无菌操作。
复苏操作:将细胞瓶放入37℃、5% CO培养箱中静置3-4小时稳定状态,显微镜下观察细胞形态和密度,记录初始状态(建议40x、100x、200x各拍一张照片)。
2. 细胞传代
传代时机:当细胞密度达80%汇合度时进行传代。
操作步骤:
弃去旧培养基,用无钙镁PBS润洗细胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液(1-2 mL),37℃孵育1-2分钟,显微镜下观察细胞变圆脱落。
加入5 mL完全培养基终止消化,轻轻吹打使细胞完全脱落。
离心(1000 RPM,5分钟),弃上清,用1-2 mL培养基重悬。
按1:2比例分瓶传代(如T25瓶分至两个T25瓶),补充新鲜培养基至5 mL。
换液频率:每2-3天换液一次。
3. 细胞冻存
冻存液:使用无血清冻存液。
冻存步骤:细胞传代后,用胰蛋白酶消化并离心,重悬于冻存液,缓慢降温至-80℃,最终转入液氮长期保存。
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核心特点:
高度生理相关性:保留了体内来源组织的结构、功能和基因表达特征。
有限寿命:与无限增殖的肿瘤细胞系不同,原代细胞增殖能力有限,经过一定次数的分裂后会进入衰老期,这更符合正常细胞的生理状态。
异质性:初始培养物通常是多种细胞类型的混合物,有时需要通过差速贴壁等方法进行纯化。
操作要求高:对培养环境、试剂质量和无菌操作的要求极为严格,培养难度大于永生化细胞系。
关键字: 人腹膜微血管内皮细胞;腹膜组织;贴壁;
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