产品介绍:
NCI-H157细胞专用培养基由团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持NCI-H157细胞最佳的生长状态。
本产品中已包含NCI-H157细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于NCI-H157细胞的培养。
产品名称 | NCI-H157人非小肺腺癌细胞专用培养基 | 货号 | P-X248 |
英文名称 | NCI-H157细胞专用培养基 | 规格 | 125ML、500ML |
产品主要成分
RPMI-1640 基础培养基 445 ml
特级胎牛血清 50 mL
P/S青霉素-链霉素 5 mL
运输和保存
运输:放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2个月;-20℃,避光,保存6个月。
质量控制
检测项目 | 质量控制 |
澄清度 | 澄清 |
PH | 7.3±0.2 |
内毒素含量 (EU/mL) | ≤10 |
无菌检测 | 细菌 | 阴性 |
真菌 | 阴性 |
支原体 | 阴性 |
细胞生长试验 | 细胞形态 | 正常 |
细胞生长实验 | 合格 |
实验原理:
以RPMI-1640培养基为基础,添加10%优质胎牛血清和1%抗生素,模拟人非小肺腺癌细胞的生长环境,为NCI-H157细胞提供充足的营养物质和能量,支持细胞的贴壁生长和增殖,维持细胞的肺腺癌特性,用于肺腺癌的研究和药物筛选。
使用方法:
1. 培养基配制(若为干粉或基础培养基)
将500ml基础培养基溶解于适量超纯水中,搅拌均匀。
依次加入5ml生长添加剂、10ml特级胎牛血清和5ml双抗,轻轻摇匀。
用无菌滤膜(0.22μm孔径)对混合后的培养基进行过滤除菌,转移至无菌容器中备用。
2. 细胞培养操作
(1)复苏细胞
将含有1ml细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中,轻轻摇晃加速解冻。
解冻后,将细胞悬液转移至无菌离心管中,加入4ml完全培养基混合均匀。
1000rpm离心3min,弃去上清液,加入1-2ml完全培养基重悬细胞。
将细胞悬液接种至T25培养瓶或6cm培养皿中,补充适量完全培养基,置于37℃、5%CO₂培养箱中培养过夜,第二天换液并检查细胞密度。
(2)传代培养
当细胞密度达到80%-90%时,进行传代操作。首先弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入1ml消化液(0.25%Trypsin-0.02%EDTA)浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-3min,显微镜下观察细胞大部分变圆并脱落时,迅速拿回操作台。
轻敲培养瓶,加入2-3ml完全培养基终止消化,轻轻吹打制成单细胞悬液。
将细胞悬液转移至无菌离心管,1000rpm离心5min,弃去上清液,加入1-2ml完全培养基重悬细胞。
按1:2的比例将细胞悬液接种至新的培养瓶或培养皿中,补充完全培养基至8ml,置于培养箱中继续培养。
(3)细胞冻存
待细胞生长状态良好时,收集细胞悬液,1000rpm离心4min,弃去上清液,用PBS清洗一遍。
加入无血清冻存液,调整细胞密度至5×10⁶~1×10⁷/mL,轻轻混匀。
将细胞悬液分装至冻存管中,每管1ml,做好标记。
将冻存管放入-80℃冰箱预冻24h后,转入液氮罐中长期储存。
公司正在出售的产品:
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非洲绿猴肾细胞;BS-C-1 | Lengsin蛋白(LGSN)ELISA试剂盒 |
中国仓鼠卵巢细胞-二氢还原缺陷型;CHO/dhFr- | 甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)ELISA试剂盒 |
人肺腺癌耐药性细胞 | 人γ干扰(IFN-γ)抗体试剂盒ELISA |
注意事项:
整个操作过程必须严格遵守无菌操作规范,避免细菌、真菌等微生物污染培养基和细胞。
运输用的灌液培养基不能再用于培养细胞,收到细胞后需更换为按照说明书新配制的完全培养基。
为保证细胞存活率,收到冻存细胞后请立即解冻复苏,若无法立即操作,冻存细胞可在-80℃条件下保存1个月。
首次传代建议采用1:2的传代比例,后续可根据细胞生长情况调整传代比例。
产品仅供科学研究使用,不可用于动物或人类疾病的治疗及临床诊断。
关键字: NCI-H157;人非小肺腺癌;细胞专用培养基;
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