小鼠肺动脉平滑肌细胞永生化细胞专用培养基

小鼠肺动脉平滑肌细胞永生化细胞专用培养基

商品属性：

产品介绍：

小鼠肺动脉平滑肌细胞永生化细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持小鼠肺动脉平滑肌细胞永生化细胞 最佳的生长状态。

本产品中已包含小鼠肺动脉平滑肌细胞永生化细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于小鼠肺动脉平滑肌细胞永生化细胞的培养。

平滑肌细胞培养体系      500 ml

产品主要成分

平滑肌细胞基础培养基         440 ml

平滑肌细胞培养添加剂    5 ml

特级胎牛血清         50 ml

P/S青霉素-链霉素     5 ml

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：    2℃～8℃，避光，保存2个月；-20℃，避光，保存6个月。
质量控制

实验原理：

以DMEM高糖培养基为基础，添加10%优质胎牛血清、1%双抗及肺动脉平滑肌细胞生长因子（如PDGF），模拟小鼠肺动脉平滑肌永生化细胞的心血管微环境。培养基中的成分可支持细胞增殖并维持其平滑肌细胞功能（如肺动脉收缩、肺动脉高压调节），用于小鼠肺动脉高压、肺心病等疾病的研究及药物筛选。
使用方法：

（一）常规使用步骤

培养基从 2~8℃取出，37℃水浴预热 15~20min，避免冷刺激细胞。

超净台内用 75% 酒精擦拭培养基瓶身，无菌操作开封。

吸弃培养瓶中旧培养基，加入预热的专用培养基（T25 瓶加 5~6mL，T75 瓶加 12~15mL）。

置于37℃、5% CO₂、饱和湿度培养箱培养。

（二）细胞复苏

液氮取出冻存管，37℃快速融化（1~2min），75% 酒精消毒后转入超净台。

细胞悬液转移至含 5mL 预热专用培养基的 15mL 离心管，1000rpm（200g）离心 3min，弃上清。

加 5mL 专用培养基重悬，转入 T25 培养瓶，37℃培养，次日换液去除死细胞。

（三）细胞传代（80~90% 汇合度）

吸弃旧培养基，无菌 PBS（无 Ca²⁺/Mg²⁺）洗细胞 1~2 次，吸弃 PBS。

T25 瓶加 1mL 0.25% 胰酶 - EDTA，37℃消化1~3min，显微镜下见细胞变圆、间隙增大即终止。

加 3~4mL 专用培养基终止消化，轻柔吹打至单细胞悬液，1000rpm 离心 3min，弃上清。

专用培养基重悬，按1:3~1:4分瓶，补足培养基后 37℃培养。

（四）细胞冻存

传代步骤收集细胞，离心弃上清。

冻存液（90%FBS+10%DMSO）重悬，密度1~3×10⁶细胞 / 管。

分装入冻存管，程序降温盒 - 80℃过夜，次日转入液氮长期保存。
注意事项：

所有操作严格遵循无菌规范，避免细胞交叉污染，每次操作仅处理一株细胞

培养基开封后尽快使用，避免长时间暴露于室温，未用完部分2-8℃避光保存

细胞培养过程中，定期显微镜观察细胞状态，及时更换培养基或传代，一般2-3天更换一次培养基

实验产生的废弃培养基、细胞悬液等生物废弃物，按规定进行消毒处理后再排放

若使用预配置完全培养基，无需额外添加血清、双抗等成分，直接使用即可
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