小鼠骨髓间充质干细胞永生化细胞专用培养基

小鼠骨髓间充质干细胞永生化细胞专用培养基

商品属性：

产品介绍：

小鼠骨髓间充质干细胞永生化 细胞专用培养基由团队精心优化，经过长期测试，本产品可保持小鼠骨髓间充质干细胞永生化细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含小鼠骨髓间充质干细胞永生化细胞生长所需的各种成分，无需添加任何成分，可直接用于小鼠骨髓间充质干细胞永生化 细胞的培养。

间充质干细胞培养体系     500 ml

产品主要成分

间充质干细胞细胞基础培养基       440 ml

间充质干细胞培养添加剂         5 ml

特级胎牛血清                  50 ml

P/S青霉素-链霉素     5 ml

运输和保存

运输：放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法：    2℃～8℃，避光，保存2个月；-20℃，避光，保存6个月。
质量控制

实验原理：

以DMEM高糖培养基为基础，添加10%优质胎牛血清、1%双抗及骨髓间充质干细胞生长因子（如bFGF、LIF），模拟小鼠骨髓间充质干细胞永生化细胞的骨髓微环境。培养基中的营养成分和生长因子可支持细胞增殖并维持其多向分化潜能（如向骨细胞、软骨细胞分化），用于干细胞的再生医学研究及疾病模型构建。
培养基配置步骤：

1. 配置前准备

试剂与耗材：MEM培养基粉末（或液体）、优质胎牛血清、青霉素-链霉素混合液、5-溴-2'-脱氧尿苷（可选）、无菌超纯水、0.22μm无菌滤膜、无菌血清瓶、移液枪、无菌移液管等

无菌环境：超净工作台提前开启紫外灯照射30分钟消毒，实验人员佩戴无菌手套、口罩，操作前用75%酒精擦拭双手和工作台

2. 基础培养基配置（以粉末MEM为例）

按照MEM培养基说明书的比例，将适量培养基粉末加入到装有900ml无菌超纯水的无菌烧杯中

用磁力搅拌器充分搅拌，直至培养基粉末完全溶解

加入适量碳酸氢钠粉末（根据说明书调整），调节培养基pH值至7.2-7.4

将溶液通过0.22μm无菌滤膜过滤除菌，转移至无菌血清瓶中，标注“MEM基础培养基”及配置日期

3. 完全培养基配置

在无菌条件下，向MEM基础培养基中加入100ml优质胎牛血清（使血清终浓度为10%）

加入10ml青霉素-链霉素混合液（使双抗终浓度为1%）

若需要筛选TK-细胞，加入5-溴-2'-脱氧尿苷，使其终浓度为0.015mg/ml

轻轻摇晃血清瓶，使各成分充分混合，标注培养基名称及配置日期

4℃避光保存，使用前提前放置至室温

4. 培养基质量检测

配置完成后，取少量培养基接种于无菌培养瓶中，37℃、5%CO₂培养箱中培养24-48小时

观察培养基是否浑浊、有无菌落生长，确认无菌后方可用于细胞培养
注意事项：

所有操作严格遵循无菌规范，避免细胞交叉污染，每次操作仅处理一株细胞

培养基开封后尽快使用，避免长时间暴露于室温，未用完部分2-8℃避光保存

细胞培养过程中，定期显微镜观察细胞状态，及时更换培养基或传代，一般2-3天更换一次培养基

实验产生的废弃培养基、细胞悬液等生物废弃物，按规定进行消毒处理后再排放

若使用预配置完全培养基，无需额外添加血清、双抗等成分，直接使用即可
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